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細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)DMSO的用途有哪些?

來源:上海聯(lián)碩生物科技有限公司   2023年10月25日 09:30  

二甲基亞砜簡(jiǎn)稱DMSO。是一種含硫的有機(jī)物,能溶于乙醇、丙醇、苯和l仿等有機(jī)物。常溫下為無色無臭的透明液體。細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中,DMSO一般用作藥物溶劑,要求染毒時(shí)其濃度不超過0.1%。也配制成高濃度的母液,稀釋時(shí)取少量到培養(yǎng)基中,而細(xì)胞凍存時(shí)DMSO的濃度一般為10%。另外DMASO也是一種一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對(duì)細(xì)胞損害,改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。

二甲基亞砜DMSO的用途:
1、DMSO廣泛應(yīng)用在人、動(dòng)物細(xì)胞株及細(xì)菌噬菌體λ的低溫防護(hù)中。
2、DMSO作為緩沖液的成分,用于以下的實(shí)驗(yàn):Poly(A+)RNA的純化, E. coli感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化、PCR反應(yīng)、cDNA文庫(kù)的擴(kuò)增、DNA測(cè)序、DEAE-葡聚糖介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染、聚凝胺介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)染。
3、DMSO回收膜過濾后的DNA,用于接下來的PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4、用于DNA測(cè)序的毛細(xì)管電泳技術(shù)將5% DMSO (v/w)混入2 M尿素中,如果需要可以調(diào)整DMSO濃度到100%。
5、不同濃度的DMSO與寡核苷酸的熔點(diǎn)溫度關(guān)系。
6、低溫冷凍前用含有DMSO的培養(yǎng)基高溫培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。
7、利用DMSO修飾蛋白中的磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸殘基用作磷酸化狀態(tài)的質(zhì)譜分析(MS)。

DMSO在細(xì)胞凍存中的應(yīng)用
二甲基亞砜是一種重要的滲透型細(xì)胞保護(hù)劑。在深低溫(零下200度)保存細(xì)胞時(shí)凍存過程中,為防止細(xì)胞內(nèi)液冰晶形成、滲透壓改變、細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂等導(dǎo)致的損傷,有必要使用含有DMSO冷凍保護(hù)劑。DMSO能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞中,降低冰點(diǎn)、延緩凍存過程,同時(shí)提高細(xì)胞內(nèi)離子濃度,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少細(xì)胞損傷。深低溫時(shí)二甲基亞砜的細(xì)胞毒性受到抑制。復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作要快,盡快洗掉二甲基亞砜,否則會(huì)造成對(duì)細(xì)胞嚴(yán)重的毒性。二甲基亞砜(DMSO)是目前細(xì)胞凍存保護(hù)劑,但也是一種以細(xì)胞毒性很大的化學(xué)試驗(yàn)劑。研究結(jié)果表明,培養(yǎng)液中DMSO濃度為10%時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率近100%;1‰濃度時(shí)抑制率為35%,即使是0.04‰的濃度,DMSO對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)也有不利的影響。

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