“哎，這次細胞活率太差了吧！”

“怎么會這么少？是細胞計數儀不準還是細胞被污染了？”

“媽呀，細胞融合度都接近100%了，趕緊凍掉。”

“天啊，凍存管爆管啦！細胞液濺的到處都是！

如果您解凍的細胞出現上述情況時，那就要格外注意了！

實際上，細胞的凍存與解凍是兩個關鍵的工藝過程，彼此間又是反向過程，它們直接決定了最終細胞樣本的活率及傳代的效果，關鍵是要把握好緩“凍”速“融”！

一、那么細胞如何凍? 怎么凍?

如果直接放到-80℃冰箱或者-196℃液氮里凍存的話，那么最終收獲的細胞幾乎“傷亡殆盡”說成”全軍覆沒“亦不為過。早期，細胞凍存前需要采用異丙醇程序降溫盒，因為其在-80℃冰箱中存放后，可以實現-1℃/分鐘的降溫速率，但是由于異丙醇存在刺激性氣味，長期使用存在泄露危險，對人體健康危害頗多，該方法目前基本被淘汰。

另一種泡沫材質的程序降溫盒，最早由美國Biocision公司開發，通過結構設計及冷氣流通原理實現梯度降溫，但這也限制了降溫速率，不同劑量、不同配比、不同種類的細胞，尤其那些對溫度變化敏感的細胞，應該采用不同的降溫曲線，隨著生命技術行業快速發展，程序降溫盒這種非智能化降溫工具正被高科技設備所替代。

細胞的梯度降溫應采用可變溫控制的程序降溫儀，在符合GMP要求下，需要對降溫工藝數據曲線可以報告形式打印輸出，且可對批次記錄進行后續的審計追蹤。

A. 通過控制氣相狀態液氮添加量來實現細胞樣本的梯度降溫，這一類相關設備在生物制藥行業普遍使用，可直接將樣本降到-130℃以下的深低溫條件。CBS 2101型程序降溫儀，就是采用這一原理對細胞樣本進行梯度降溫。

通過集成的PC電腦端將降溫工藝參數輸入到配套的軟件中，內置溫度傳感系統，軟件與硬件相結合控制著腔體內的生物樣本降溫！30L的存儲空間，可以實現數百支凍存管樣本預冷效果，亦可以提供更大尺寸容量的降溫設備！