大腸桿菌LacZ基因是用于檢測(cè)載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移的表達(dá)效率的常用報(bào)告基因。它也經(jīng)常用于研究基因啟動(dòng)子調(diào)控。LacZ編碼β-半乳糖苷酶，這是一種幾乎完-全理想的表達(dá)選擇，因?yàn)樗浅７€(wěn)定，對(duì)蛋白水解降解具有抗性，能夠利用多種底物，并且易于原位檢測(cè)。

AkrivisBio 的β-半乳糖苷酶染色試劑盒是一種簡(jiǎn)單、靈敏的檢測(cè)方法，它利用X-Gal（一種無(wú)色底物），產(chǎn)生強(qiáng)烈的藍(lán)色不溶性靛藍(lán)產(chǎn)物，在顯微鏡下很容易觀察到。

艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色試劑盒：

Catalog：COS-0104

Size: Includes reagents to stain 20 x 12-well plates or the equivalent volume of 6 or 24-well plates.

Sample Type：Adherent Cells, Suspension Cells

Species：All

Method of Detection：Light Microscopy

Assay Type：Qualitative

Application：For visualizing β-Galactosidase activity in cells under a light microscope.

Range The response is highly linear between 10000 – 100000 cells per well

Storage Conditions：-20°C

Shipping Temperature：Gel Pack

Shelf Life：One year from the date of delivery

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目錄：COS-0104

尺寸：包括用于染色20 x 12孔板或等效體積的6或24孔板的試劑。

樣品類型：粘附細(xì)胞、懸浮細(xì)胞

物種：全部

檢測(cè)方法：光學(xué)顯微鏡

化驗(yàn)類型：定性

應(yīng)用：用于在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞中β-半乳糖苷酶的活性。范圍反應(yīng)高度線性，每孔10000–100000個(gè)細(xì)胞

儲(chǔ)存條件：-20°C

運(yùn)輸溫度：凝膠包裝

保質(zhì)期：一年

AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色試劑盒組成：

固定劑125 ml NM COS-0104-A

X-Gal凍綠COS-0104-B

染色緩沖液125 ml WM COS-0104-C

染色補(bǔ)充1.5 ml紅色COS-0104-D

用戶提供的材料：

PBS~1L

DMSO或DMF

聚丙烯管，如Eppendorf和類似的帶帽錐形微管。不要使用聚苯乙烯容器。70%甘油

染色方案：

A.一般考慮：

該方案是為12孔培養(yǎng)板中的孔設(shè)計(jì)的。如果使用其他板，則按比例增加或減少體積。

B.試劑制備：

將20 mg X-Gal溶解在1 ml DMSO或DMF中，提供20倍儲(chǔ)備溶液。未使用的X-Gal溶液可以在–20°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。

注意：一定要使用聚丙烯容器或玻璃制作和儲(chǔ)存X-gal。不要使用聚苯乙烯。如果發(fā)生沉淀，只需加熱溶液即可重新溶解沉淀。

C.污點(diǎn)：

取出培養(yǎng)基并用1ml PBS洗滌細(xì)胞一次。在室溫下用0.5毫升Fixative固定細(xì)胞10-15分鐘。當(dāng)細(xì)胞處于固定劑中時(shí)，僅使用聚丙烯管制備以下染色溶液。每個(gè)孔需要0.5 ml。準(zhǔn)備足夠的染色溶液，用于使用：染色緩沖液：470µl染色補(bǔ)充液：5µl20 mg/ml X-gal在DMF 25µl4中染色的孔數(shù)。用1ml PBS洗滌細(xì)胞兩次。向每個(gè)孔中加入0.5 ml染色溶液，蓋上平板，在37°C.6下孵育過夜。第二天，在顯微鏡下以約200倍的放大倍數(shù)觀察細(xì)胞的藍(lán)色。為了長(zhǎng)期保存染色板，去除染色溶液并用70%甘油覆蓋細(xì)胞。在4°C下儲(chǔ)存。

艾美捷科技是AkrivisBio的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。