過去用于檢測Tg自身抗體的方法有：沉淀試驗、間接免疫熒光（11F）、血凝試驗、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法熒光圖形為在甲狀腺濾泡腔內出現波浪狀著染。

在甲狀腺炎患者中抗TPO抗體檢測方法的靈敏度稍遜于抗Tg抗體，但實際上兩者的檢出率不相上下。用高靈敏度方法檢測Tg，可能會降低與疾病相關的特異性。一些評估Tg自身抗體特異性的研究表明，甲狀腺功能正常的個體與自身免疫性甲狀腺炎免疫應答之間存有一定的差別。正常人亦可產生能識別相同或具有交叉反應性抗原表位的抗體。另一方面，慢性甲狀腺炎患者能產生識別Tg分子中種族特異抗原表位。
抗Tg抗體和抗TPO抗體為甲狀腺炎的鑒別診斷提供有效的檢測手段，98％以上的甲狀腺炎癥患者血清中含其中一種或兩種自身抗體，如Tg、TPO抗體均為陰性的就可排除甲狀腺炎。但是，呈陽性者亦不能排除甲狀腺癌和甲狀腺功能亢進，由于這兩種疾病患者也能產生抗Tg和（或）TPO抗體。此外，相當一部分正常人血清中也存在上述兩種自身抗體，且與年齡、性別相關。慢性甲狀腺炎患者自身抗體水平偏低。
英國的一個研究小組對甲狀腺自身抗體陽性跟蹤隨訪20年得出結論，甲狀腺自身抗體持續陽性是日后發生自身免疫性甲狀腺功能障礙的一個危險因子。分化型甲狀腺癌術后患者血清Tg抗體水平升高，預示復發或轉移。
關于Tg抗體在甲狀腺疾病或其他疾病中的檢出率，因檢測方法和調查人群的不同而異。用鞣酸紅細胞凝集法檢測Tg抗體，顯示慢性淋巴細胞甲狀腺炎陽性率為76％，原發性黏液腺瘤為72％、甲狀腺功能亢進33％，膠質性甲狀腺腫大8％，結節性甲狀腺腫85％，甲狀腺腺瘤28％，甲狀腺癌則為13％～65％不等。抗Tg抗體亦可出現在其他內分泌疾病中，如惡性貧血（27％），Addison病（28％）以及糖尿病（20％）。隨機抽樣700名健康女性，18％含有抗Tg抗體。但抗體檢出率隨年齡不同而不同，老年女性30％為陽性；而同齡男性為3％～6％。除了年齡、地理分布和環境因素（如飲食中碘含量）都能影響Tg抗體的檢出率。