膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶,它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu),而不損傷其他蛋白質(zhì)和組織。
膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì),因此它對(duì)溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)象和性質(zhì)。
配置:
膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配置、消毒滅菌和儲(chǔ)藏。
注意:
因?yàn)镮型膠原酶分子顆粒比胰酶大,不容易過(guò)濾,因此可以用蔡式濾器過(guò)濾除菌。
鈣、鎂離子和血清成分不會(huì)影響膠原酶的消化作用,因而可用BSS(如D-hanks或者PBS)或含血清的培養(yǎng)液配置。
使用方法:
1、將漂洗、修剪干凈的組織剪成1-2mm左右的小塊。
2、將組織放入離心管或三角燒瓶中加入30-50倍體積的膠原酶溶液,旋緊蓋子或密封燒瓶。
3、將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內(nèi)每隔3分鐘振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。
4、收集消化液(有時(shí)含個(gè)別組織塊及沒(méi)有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網(wǎng)過(guò)濾),離心1000r/min,5min,除去上清,用Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心漂洗1-2次,除去上清,加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)瓶。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。