吡啶核苷酸在代謝中起著重要作用,因此,人們對監(jiān)測其濃度水平一直感興趣。NAD+/NADH的定量測定在細胞或組織的能量轉化和氧化還原狀態(tài)的研究中有應用。測量NAD+/NADH濃度的簡單、直接和自動化程序是非常理想的。Assay Genie ChromaDazzle NAD/NADH比率檢測試劑盒基于乳酸脫氫酶循環(huán)反應,其中形成的NADH還原甲氮(MTT)試劑。在565nm處測量的降低的產物顏色的強度與樣品中的NAD+/NADH濃度成比例。該測定法對NAD+/NADH具有高度特異性,NADP+/NADPH的干擾極小(<1%)。我們的測定法是一種測量NAD、NADH及其比值的方便方法。
艾美捷 NAD/NADH比率測定試劑盒:
目錄代碼:BA0067
包裝尺寸:100assays
僅供研究使用
應用直接分析:細胞或組織提取物中NAD+/NADH的濃度和比率。
NAD/NADH比率測定試劑盒主要功能:
1、靈敏準確。在96孔板法中,檢測限為0.05 mM,線性高達10μM NAD’/NADH。實用的該程序包括添加一種工作試劑,并在室溫下讀取時間零點和15分鐘的光密度。
2、高吞吐量。可作為每天數千個樣品的高通量96孔板法容易地自動化。
儲存條件。這套裝備是用冰塊裝運的。將所有試劑儲存在-20°C溫度下。保質期:收到后6個月。
注意事項:試劑僅供研究使用。使用試劑時,應采取實驗室試劑的常規(guī)預防措施。有關詳細信息,請參閱材料安全數據表。
一般注意事項:
1.在這些濃度下,NAD和NADH的標準曲線是相同的。由于溶液中的NADH不穩(wěn)定,我們只提供NAD作為標準品。
2.該測定基于酶催化的動力學反應。工作試劑的添加應迅速,混合應簡短但徹-底。建議使用多通道移液器。
3.以下物質會干擾樣品制備,應避免使用。EDTA(>0.5 mM)、抗壞血酸、SDS(>0.2%)、疊-氮-化-鈉、NP-40(>1%)和Tween-20(+1%)。
4.對于丙酮酸鹽含量高于100μM的樣品,我們建議使用內標。
96孔板法的標準曲線:
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