牛血管內(nèi)皮生長因子B (VEGFB) ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫測(cè)定法,用于體外定量測(cè)量牛血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解物、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液中的VEGFB。
艾美捷牛血管內(nèi)皮生長因子B (VEGFB) ELISA試劑盒:
貨號(hào) RDR-VEGFB-b
檢測(cè)范圍 31.2-2000皮克/毫升
敏感性 7.8皮克/毫升
檢測(cè)長度 1-3小時(shí)
方法 sandwich
存儲(chǔ) 所有組件均可在 -20°C 下儲(chǔ)存長達(dá) 16 個(gè)月
即用型 預(yù)稀釋的檢測(cè)試劑和增強(qiáng)的穩(wěn)定性
樣品類型 血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解物、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物體液。
基因識(shí)別 282121
牛血管內(nèi)皮生長因子B (VEGFB) ELISA試劑盒樣品收集和儲(chǔ)存:
血清-使用血清分離管,讓樣品在室溫下凝結(jié)2小時(shí)或在4°C下凝結(jié)過夜,然后在約1000×g下離心20分鐘。立即測(cè)定新制備的血清,或?qū)悠穬?chǔ)存在-20°C或-80°C的等分試樣中,以備日后使用。避免重復(fù)凍融循環(huán)。?
血漿-使用EDTA或肝素作為抗凝劑收集血漿。在收集后30分鐘內(nèi),在2-8°C下,以1000×g離心樣品15分鐘。立即取出血漿并進(jìn)行分析,或?qū)悠穬?chǔ)存在-20°C或-80°C的等分試樣中,以備日后使用。避免重復(fù)凍融循環(huán)。?
組織勻漿-組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。對(duì)于該測(cè)定,組織應(yīng)在冰冷的PBS(0.01 mol/L,pH 7.0-7.2)中沖洗以徹-底去除多余的血液,并在均化前稱重。將組織切成小塊,并用冰上的玻璃勻漿器在5-10毫升PBS中勻漿(微組織研磨機(jī)也可以)。所得懸浮液應(yīng)使用超聲細(xì)胞破碎器進(jìn)行超聲處理或進(jìn)行2次冷凍/解凍循環(huán)以進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜。然后,將勻漿在5000×g下離心5分鐘。立即取出上清液并進(jìn)行測(cè)定或等分試樣并在≤-20°C下儲(chǔ)存。
細(xì)胞裂解物-在根據(jù)以下指示進(jìn)行分析之前,必須對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解。
1. 用胰蛋白酶分離粘附細(xì)胞,然后離心收集(懸浮細(xì)胞可以直接離心收集)。
2. 在冷PBS中洗滌細(xì)胞3次。
3. 將細(xì)胞在PBS(1×)中復(fù)蘇,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行4次超聲處理(或在≤-20°C下冷凍細(xì)胞。溫和混合解凍細(xì)胞。重復(fù)冷凍/解凍循環(huán)3次。)。
4. 在2-8°C下以1500×g離心10分鐘以去除細(xì)胞碎片。?
細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物流體。在1000×g下離心樣品20分鐘。立即去除顆粒并進(jìn)行測(cè)定,或?qū)悠穬?chǔ)存在-20°C或-80°C的等分試樣中。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
注:
1.5天內(nèi)使用的樣品可以在4°C下儲(chǔ)存,否則樣品必須在-20°C(≤1個(gè)月)或-80°C(≥2個(gè)月)下儲(chǔ)存,以避免生物活性損失和/或污染。
2.明顯的溶血會(huì)影響抗體-抗原反應(yīng)。有溶血跡象的樣品不可用于本試驗(yàn)。
3.進(jìn)行分析時(shí),將樣品置于室溫下
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