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干貨分享|病毒純化過程中,該如何正確使用全能核酸酶?

來源:上海瑋馳儀器有限公司   2023年08月18日 18:29  





病毒疫苗的生產、細胞治療與基因治療等領域均可能會用到病毒,對其質量進行控制對于保障上述產品的安全性和有效性具有及其重要意義。其中HCD殘留可能會傳遞腫瘤或病毒相關基因,造成潛在的危險性,因此,去除宿主核酸或在程度上降低其殘留刻不容緩。




逐典Pannarase全能核酸酶

逐典Pannarase全能核酸酶是一種來源于Serratia marcescens的非特異性核酸內切酶,該酶可以將任何形式的 DNA 和 RNA  (線性、環形、超螺旋)降解成3-5bp的寡核苷酸,并可在一系列寬泛的操作條件下保持高效性。






接下來小編就帶您

一起了解

在病毒純化過程中

如何正確使用全能核酸酶


常見的病毒純化流程


全能核酸酶應用條件

全能核酸酶的酶活會受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強度等),故用量范圍也會從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環境下酶的最佳濃度不同,需要通過實驗設置梯度進行最佳條件的摸索。

以下是文獻中具體的應用實例:

1. 樣品:狂犬病毒濃縮液

處理條件:核酸酶濃度50~90U/ml ,

37 ℃處理 2 h,轉入18 ~ 26 ℃處理 6h




2. 樣品:狂犬病病毒濃縮液

處理條件:25、50和100 U/ml,37℃



3. 樣品:流感病毒濃縮液

處理條件:10 U/mL,37℃



參考文獻

[1] 崔燕平. 非限制性核酸內切酶對狂犬病疫苗中Vero細胞DNA的去除作用[J]. 中國生物制品學雜志, v.27(04):444-447.

[2] 劉杰,劉輝,楊會強,康莊,孫艷,毛川成,何敏,李玉華.多種方法結合去除凍干人用狂犬病疫苗中Vero細胞殘留DNA[J].中國生物制品學雜志,2013,26(12):1827-1830.

[3] 阮朝列,施錦麗,李衛東等.Benzonase核酸酶在Vero細胞流感病毒滅活疫苗中的應用研究[J].病毒學報,2023,39(04):980-990.




逐典Pannarase全能核酸酶E.coli中表達純化并在GMP條件下生產,可高效去除各種樣品中的核酸雜質,助力解決廣大疫苗生產、基因和細胞治療廠商解決產品的核酸殘留問題;此外某些病毒生產中可能會涉及到高鹽的環境,逐典Pannarase耐高鹽全能核酸酶將成為您“疑難雜癥”的選擇!



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