你是否因?yàn)榧?xì)胞轉(zhuǎn)染效率低,經(jīng)過(guò)優(yōu)化各種參數(shù)仍解決不了問(wèn)題而苦惱呢,那不妨來(lái)檢測(cè)一下支原體吧,一種細(xì)胞的隱形殺手。
電轉(zhuǎn)是一個(gè)常規(guī)但不簡(jiǎn)單的細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。轉(zhuǎn)染試劑、轉(zhuǎn)染條件、底物質(zhì)量等對(duì)電轉(zhuǎn)效率的影響至關(guān)重要,Lonza Nucleofector技術(shù)為您提供電轉(zhuǎn)整套解決方案。
除了以上幾點(diǎn),還需要保持良好的細(xì)胞狀態(tài)。細(xì)胞狀態(tài)不好,往往會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低下,為確保良好的細(xì)胞狀態(tài),需注意以下幾點(diǎn):
細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,此時(shí)細(xì)胞膜的恢復(fù)能力更強(qiáng),從而提高電轉(zhuǎn)后的細(xì)胞存活率。
細(xì)胞的傳代次數(shù)應(yīng)較低,轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前,細(xì)胞解凍后傳代3~4次。
必須進(jìn)行支原體污染的常規(guī)檢查。支原體生長(zhǎng)緩慢,非常隱蔽,很難監(jiān)測(cè)和預(yù)防,細(xì)胞被支原體污染后,不會(huì)馬上死亡,但幾乎可以改變細(xì)胞的所有功能,包括細(xì)胞新陳代謝、酶的作用途徑,染色體畸變、細(xì)胞膜的組成等。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體污染也會(huì)極大地影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率。
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Lonza MycoAlert™支原體檢測(cè)試劑盒主要有兩大優(yōu)勢(shì):
1)操作簡(jiǎn)單;
2)檢測(cè)時(shí)間短。
其通過(guò)檢測(cè)在支原體和其柔膜細(xì)菌中存在的乙酸激酶和氨基甲酸激酶的活性,完成支原體檢測(cè)。僅需兩步簡(jiǎn)單操作,20分鐘即可完成檢測(cè)。
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