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Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒化驗(yàn)原理&文獻(xiàn)參考

來(lái)源:武漢艾美捷科技有限公司   2023年07月12日 16:04  

ADP-核糖基化(Poly ADP-ribosylation,標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù))是真核細(xì)胞中的一種翻譯后修飾,可調(diào)節(jié)修飾后蛋白質(zhì)的活性,并將其與其他蛋白質(zhì)結(jié)合他們與其他人的互動(dòng)。這種修飾是由聚ADP核糖聚合酶介導(dǎo)的(PARPs)和ADP核糖基轉(zhuǎn)移酶2ART2),其使用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)作為基底ADP-核糖基化可被PAR降解酶如聚(ADP-核糖)逆轉(zhuǎn)糖水解酶(PARG)和ADP核糖水解酶3ARH3)(圖1)。

 

ADP核糖基化參與不同的生物學(xué)功能,如致癌、分化以及細(xì)胞死亡。ADP核糖基化活性的失調(diào)與諸如癌癥、病毒感染和神經(jīng)變性等疾病。ADPribosation受研究的作用之一是產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)鏈以應(yīng)對(duì)DNA損傷。使用這些標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)鏈募集修復(fù)蛋白和染色質(zhì)重塑因子。因此,DNA修復(fù)過(guò)程增強(qiáng)。這可能是腫瘤逃避細(xì)胞凋亡的一種機(jī)制。最近PARP家族成員在治療某些癌癥方面表現(xiàn)出了希望,有三種藥物可在美國(guó)和歐洲買到,主要用于治療BRCA突變卵巢癌癥

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1ADP核糖基化反應(yīng)。PARP酶水解NAD+并將ADPribose基團(tuán)(ADPr)轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)受體上。幾個(gè)相互連接的ADPr單元生成一個(gè)長(zhǎng)帶負(fù)電的聚合物。這些聚合物被PARGARH3降解。

 

艾美捷Cell Biolabs Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒#XDN-5114是一種為快速檢測(cè)而開(kāi)發(fā)的酶免疫測(cè)定試劑盒以及細(xì)胞或組織樣本中標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)水平的定量。通過(guò)比較未知樣品的吸光度和已知標(biāo)準(zhǔn)曲線的吸光度,確定未知樣品中標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)的數(shù)量。該套件有一個(gè)每個(gè)試劑盒提供足夠的試劑進(jìn)行多達(dá)96次測(cè)定,包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣本

 

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒化驗(yàn)原理:

PolyADP-核糖)ELISA試劑盒是一種夾心ELISA試劑,用于定量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)。首先將樣品或標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)標(biāo)準(zhǔn)品添加到單克隆抗PAR抗體涂層微孔板中。在短暫培養(yǎng)后,添加抗PAR多克隆檢測(cè)抗體,然后添加HRP結(jié)合的第二抗體。添加基質(zhì)后,發(fā)生比色反應(yīng)用比色板讀數(shù)器測(cè)量。未知樣品中的標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)含量由以下公式確定將此吸光度與標(biāo)準(zhǔn)桿數(shù)聚合物標(biāo)準(zhǔn)曲線中的吸光度進(jìn)行比較。

 

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒組分:

箱子1(在室溫下裝運(yùn))

1.96孔蛋白質(zhì)結(jié)合板(零件號(hào)231001):一個(gè)帶孔96孔板

2.抗聚(ADP核糖)涂層抗體(零件號(hào)51146C):一個(gè)20µL小瓶

3.抗聚ADP核糖檢測(cè)抗體(零件號(hào)51142C):一個(gè)15µL小瓶

4.第二抗體,HRP綴合物(1000X)(零件號(hào)51143C):一個(gè)15µL小瓶

5.含量測(cè)定稀釋劑(零件號(hào)310804):一瓶50 mL

6.10X洗滌緩沖液(零件號(hào)310806):一瓶100毫升

7.基質(zhì)溶液(零件號(hào)310807):一個(gè)12 mL琥珀色瓶子

8.停止溶液(零件號(hào)310808):一瓶12 mL

9.100X PARP抑制劑(零件號(hào)51145C):一瓶3 mL琥珀色3-氨基苯甲酰胺(3-AB

在二甲基亞砜中為100 mg/mL735 mM

 

箱子2(藍(lán)色冰袋裝運(yùn))

1.聚(ADP核糖)標(biāo)準(zhǔn)品(零件號(hào)51144D):一個(gè)10µL小瓶,2.5µM

 

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考:

1. Miwa, M. and Masutani, M. (2017). PolyADP-ribosylation and cancer. Cancer Sci. 98(10):1528-

35.

2. Lüscher, B. et al. (2018). ADP-Ribosylation, a Multifaceted Posttranslational Modification

Involved in the Control of Cell Physiology in Health and Disease. Chem Rev. 118(3):1092-1136.

3. Martin-Hernandez, K. et al. (2017). Expanding functions of ADP-ribosylation in the maintenance

of genome integrity. Semin Cell Dev Biol. 63:92-101.


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