細胞計數是細胞培養過程中的重要步驟,為了解細胞的濃度、數量和活率等信息,實驗人員常用臺盼藍染料或AOPI熒光染料對細胞進行染色-計數。
1、臺盼藍染色法
臺盼藍染色是細胞計數中常用的活/死細胞鑒定染色方法之一。
原理:正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不被染色;而死細胞的胞膜不完整,通透性增加,既死細胞會被染成藍色,利用臺盼藍染料的特性便可區分活/死細胞。
缺點:
1-臺盼藍對細胞有毒害作用,會致死有損傷的細胞,導致細胞活性檢測結果有所偏差;
2-細胞碎片多、雜質多等情況下,無法進行準確計數。
適用細胞種類:培養系細胞。
2、AOPI染色法
當細胞樣品中的雜質過多,明場下無法進行準確計數時,我們可以在熒光通道下,用AOPI熒光染料對細胞進行染色。
原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結合的特性——既活細胞呈現綠色,死細胞呈現紅色,利用AOPI染色法,可排除雜質對目標細胞的干擾,快速區分活/死細胞。
優點:可排除紅細胞、血小板、細胞碎片等雜質對目標細胞的干擾。
缺點:與臺盼藍試劑相比,成本較高。
適用細胞種類:免疫細胞、原代細胞、血液細胞等。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。