隨著分子生物學和基因工程領域的不斷發展,細胞轉染技術的需求也越來越迫切。在當前的研究中,常用的細胞轉染方法包括化學轉染法、電穿孔法、病毒載體轉染法等。然而,這些傳統的細胞轉染方法存在許多局限性,如低效率、不穩定性、細胞毒性等問題。為了克服這些限制,現已出現了一種新型細胞轉染技術——4D-Nucleofector轉染系統。
4D-Nucleofector轉染系統是由Lonza公司開發的一種基于脈沖電場技術的細胞轉染系統,其主要特點是可實現對不同類型細胞的高效、精準轉染,并且無需使用病毒載體或熒光標記物。該系統通過電場脈沖引導外源DNA或RNA進入目標細胞,從而實現轉染。與傳統的電穿孔法相比,4D-Nucleofector轉染系統具有更高的細胞存活率、更高的轉染效率和更低的細胞毒性,因此被廣泛應用于分子生物學、藥物篩選、細胞治療等領域。
在使用4D-Nucleofector轉染系統時,首先需要選擇適合自己實驗樣品的Nucleocuvette®試管。隨后,將目標細胞接種在Nucleocuvette®試管中,并加入所需的外源DNA或RNA。接下來,設置適當的轉染程序,包括不同的脈沖電場強度、持續時間和間隔時間。最后,將Nucleocuvette®試管放置在相應的設備中,進行電脈沖轉染。整個過程只需幾分鐘即可完成。
4D-Nucleofector轉染系統的優點主要包括以下幾個方面:
1.高轉染效率:4D-Nucleofector轉染系統可以實現高達90%以上的細胞轉染效率,遠高于傳統的細胞轉染方法。
2.細胞存活率高:由于該系統對細胞的影響較小,因此轉染后的細胞存活率比較高,能夠保證后續實驗的穩定性和有效性。
3.可控性強:4D-Nucleofector轉染系統可以根據實驗需要對脈沖電場強度、持續時間和間隔時間進行精確控制,從而實現更加精準的轉染。
4.適用范圍廣:該系統適用于各種類型的細胞,包括哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞等,具有較高的通用性。
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