上一集探秘黑膠蟲（上），我們主要討論了部分黑膠蟲樣本鑒定為細菌這一情況，此外，還有一部分黑膠蟲樣本鑒定為支原體。這里舉兩個典型黑膠蟲鑒定結果給大家分享：

圖1 固體培養基上的豬鼻支原體集落

鑒定結果：樣本7，12，18鑒定為 Mycoplasma hyorhinis（豬鼻支原體）

大小：0.15-0.3um

感染宿主：其感染豬的上呼吸系統的上皮細胞，通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴（無癥狀攜帶者）感染。

污染細胞途徑：推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取，純化獲得的結晶，再制成的凍干制劑，過濾除菌不當的胰酶溶液可能攜帶豬鼻支原體，建議大家買值得信賴的胰酶，降低污染風險。

圖2 固體培養基上的牛支原體集落

鑒定結果：樣本23鑒定為 Mycoplasma bovis（牛支原體）；

大小：0.15-0.3um

感染宿主：主要寄生于牛體內，感染部位廣泛，感染牛的呼吸道，會引起肺炎、中耳炎、關節炎、結膜炎。

污染細胞途徑：細胞增殖的主要營養之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物，其主要通過0.1um濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當，就會給細胞帶來潛在的支原體污染，因此建議大家購買值得信賴的胎牛血清。

接下來我們分析一下，上集中我們介紹了常見的黑膠蟲污染特征有活躍游動，旋轉梭動，原地顫動，這三種最常見的污染現象。支原體不像細菌，沒有可用于游動的鞭毛，顯然不太可能是活躍游動或旋轉梭動兩種現象。被鑒定為支原體污染的樣本，極有可能是這種情況的黑膠蟲樣本—我們看到的黑膠蟲在液體中原地顫動。并且支原體是目前已知的最小的原核生物，要在電子顯微鏡下才能觀察，我們能看到原地顫動的黑點極有可能是支原體集落。

首先，我們可以先看幾組可能被大家誤認為是“黑膠蟲”的原地顫動視頻：

視頻1

視頻2

視頻3

視頻4

視頻5

從這些“黑膠蟲”污染視頻中，我們可以總結出黑膠蟲形態特征：

幾乎都呈黑色橢圓點，有大有小；游離于細胞外，顫顫巍巍，仔細觀察，能發現它在原地顫動。

此外，我們在幫客戶分析細胞污染中，也發現俗說的“黑膠蟲”污染真是“別有洞天”。下面是我們的溝通分析截圖：

圖3 客戶溝通截圖中的細胞圖片

把這個圖片放大如下：

圖4 圖中紅圈中的黑點極有可能為支原體集落

接下來為了進一步確認，又讓客戶發了視頻：

圖5 客戶溝通截圖中的細胞視頻

咱們把視頻放大觀察：

視頻6

通過視頻我們可以看出很多橢圓形的小黑點在原地顫動。先前，問過客戶是否做過支原體檢測，客戶說做過，確定是支原體污染。在與客戶的單獨對話框里，我又進一步和客戶確認了是否是支原體污染，截圖如下：

圖7 和客戶的溝通截圖

通過這個案例分析，我們推測，大家所俗稱的原地顫動的“黑膠蟲”污染極有可能是支原體污染，而這些顫顫巍巍的小圓點極有可能是支原體集落。未來，我們會收集大量的這種原地顫動的小黑點樣本，做測序鑒定，進一步用大數據證實咱們的推測，把這些有意思的結果分享給大家。

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本期講解就到這里了，如有細胞培養問題，歡迎微信公眾號“愛必信生物”后臺留言。

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