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關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)瓶的相關(guān)知識
一、細(xì)胞的附著和生長
在人工附著物上，大多數(shù)離體培養(yǎng)的脊椎動物細(xì)胞呈單層生長，因此，附著物必須帶有適合細(xì)胞附著或至少適合附著因子吸附的合適電荷，附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的附著和鋪展。雖然造血細(xì)胞系、嚙齒動物的腹水瘤細(xì)胞和少數(shù)其他選擇細(xì)胞系，如人小細(xì)胞肺癌(Carne et al.，1981)可在懸浮條件下自發(fā)生長；但許多轉(zhuǎn)化細(xì)胞系也可以使它們能在懸浮條件下生長，因此，它們的生長并不依賴附著物的表面電荷。然而，大多數(shù)正常細(xì)胞增殖前，需要在附著物上鋪展 ，附著不好或過度密集造成鋪展不充分時，可抑制細(xì)胞增殖。需要附著才能生長的細(xì)胞被稱為貼壁依賴性(achorage dependent)細(xì)胞。轉(zhuǎn)化的細(xì)胞常表現(xiàn)出非貼壁依賴性(achorage independent)，它們能在振蕩培養(yǎng)條件下進(jìn)行懸浮生長，或在半固體培養(yǎng)基如軟瓊脂上進(jìn)行生長。
二、常見的細(xì)胞附著材料
一次性塑料
一次性的無菌聚丙乙烯培養(yǎng)瓶是簡單的、易生產(chǎn)的培養(yǎng)細(xì)胞附著物。它們的透光性好、生長面平滑、質(zhì)地均勻、易于生產(chǎn)。從制作工藝角度講，聚丙乙烯是疏水性的，表面不適合細(xì)胞生長，因此，用于組織培養(yǎng)的塑料要經(jīng)Y射線照射、化學(xué)處理或電離輻射，以產(chǎn)生親水的帶電表面。
玻璃
因其光學(xué)特性和表面電荷而成為最早使用的細(xì)胞附著物，但現(xiàn)在的大多數(shù)實驗室里，玻璃已被合成塑料(一般為聚丙乙烯)所取代，因為合成塑料具有較大的韌性和優(yōu)良的光學(xué)特性，雖然玻璃制品有便宜、易清洗、能保持支持細(xì)胞生長特性、可進(jìn)行干熱和濕熱滅菌、透光性好等優(yōu)點(diǎn)。只有用強(qiáng)堿(如NaOH或腐蝕性去污劑)處理，然后酸洗中和的玻璃才適于培養(yǎng)細(xì)胞 。透光性強(qiáng)的玻璃呈堿性，通常含鉛量高而可能減慢細(xì)胞生長。因此，載玻片和蓋玻片需用酸洗或涂層以達(dá)到好的效果。
三、細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)
(1)固定的單層培養(yǎng)物，生長在不受干擾的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和多孔板中。這些是最容易使用的培養(yǎng)系統(tǒng)，需要的設(shè)備最少。然而，這些系統(tǒng)對于生產(chǎn)大量的細(xì)胞來說是非常耗費(fèi)人力的。
(2)移動的單層培養(yǎng)物，主要生長在滾筒瓶中。這些容器在電動架或鼓上緩慢旋轉(zhuǎn)(大約0.5rpm到1rpm)，廣泛用于生產(chǎn)大量的細(xì)胞。 滾筒瓶采用簡單的技術(shù)，但需要投資于適當(dāng)?shù)脑O(shè)備。
(3)固定的懸浮培養(yǎng)物，在未經(jīng)處理的培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶中生長，不需要攪拌。
(4)在機(jī)械攪拌的容器(旋轉(zhuǎn)瓶)、生物反應(yīng)器或發(fā)酵罐中生長的移動懸浮培養(yǎng)物。這些系統(tǒng)在空間、勞動力和培養(yǎng)基方面是經(jīng)濟(jì)的； 因此，攪拌懸浮培養(yǎng)通常是實驗室和工業(yè)界生產(chǎn)大量細(xì)胞的方法。許多貼壁依賴細(xì)胞可以被改造成在微載體上生長，以利用這些系統(tǒng)的優(yōu)勢。
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