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影響PCR實驗的因素之一——BUNSEN本生PCR耗材

來源:本生(天津)健康科技有限公司   2023年06月01日 10:23  

  影響PCR實驗的因素之一、PCR耗材


  在PCR實驗中,影響擴增效果的因素有很多。我們能想到的有dNTP的質量與濃度、模板核酸的量與純化程度、引物的設計、DNA聚合酶的濃度、擴增長度等問題。

  實際上,使用的耗材也可能會影響實驗結果,而這往往被我們所忽略。因此在選擇實驗耗材前,我們還需要了解BUNSEN本生PCR耗材相關的特性和術語。


PCR板.jpg


  如何選擇合適的PCR耗材,本生簡述:

  1、原材料

  PCR/qPCR耗材一般都是聚丙烯(PP)材質。

  因其為生物學惰性材料,表面不易粘附生物分子,且有著良好的化學耐性,及溫度耐受性 (可121℃高壓滅菌,也可以承受熱循環過程中的溫度變化)。這些材料通常會與試劑或者樣品直接接觸,因而在生產制備過程中需要選用高質量的材料和良好的加工工藝。

  2、選擇合適的容積

  PCR管的體積規格大多數都可以滿足PCR反應要求。但是在滿足實驗要求的基礎上,優先推薦選用低容管。因為低容反應管/板有著較小的上方空間,可提高熱傳導率并降低蒸發。而且在加樣時,需要避免加樣過量或過少。過量會導致熱傳導率下降,溢出及交叉污染,而加樣過少可能會造成樣品蒸發損失。

  大家可依據具體的實驗要求選用合適的產品:

  BUNSEN本生PCR系列(八聯管,PCR板,封板膜)
  BS-PCR-081-C0.1ML 透明PCR八聯管(含光學平蓋)125排/盒,10盒/箱
  BS-PCR-081-M0.1ML 乳白色PCR八聯管(含蓋)125排/盒,10盒/箱
  BS-PCR-082-C0.2ML 透明PCR八聯管(含光學平蓋)125排/盒,10盒/箱
  BS-PCR-082-M0.2ML 乳白色PCR八聯管(含蓋)125排/盒,10盒/箱
  BS-PCR-0102-CM0.1ml/0.2mlPCR 8聯排管蓋, 光學平蓋, 透明125排/盒,10盒/箱
  BS-PCR-96-F02-C0.2ml 96孔PCR反應板10塊/盒,20盒/箱
  BS-PCR-RFMq PCR透明熱封膜100張/盒
  BS-5R-250東千用PCR八聯軟管蓋250條/包
  BS-D-250凍千用PCR八聯管

250條/包



八聯管 - 副本 - 副本 (2).jpg


  3、PCR管管蓋的選擇

  平蓋與凸蓋各有優勢:

  平蓋可為qPCR提供精確的熒光信號傳遞;便于書寫標記;合蓋容易,密封性好,易于操作。

  凸蓋與PCR儀熱蓋接觸,減少壓力引起的反應管變形,更好的防止液體蒸發。但會影響熒光信號傳遞,無法應用于qPCR實驗。

  4、96孔板裙邊的選擇

  無裙邊板:可適用于大多數的PCR儀或qPCR儀,但不適用于自動化、應用。移液過程中穩定性不高,需要配合板托使用。

  半裙邊板:可適配標簽或應用條碼,適合自動化應用,且有著較好的移液穩定性。

  全裙邊板:非常適用于自動化實驗應用,也可適配標簽及應用條碼。機械強度較好,可適用于凸出模塊的PCR儀,且移液過程中穩定性高。

  5、根據實驗選擇耗材

  根據檢測方法的不同,耗材的選擇也不同。

  PCR實驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法。普通PCR法一般是終點PCR跑膠法測定,所以所用耗材的導熱性和密封性和實驗結果有著密不可分的關系;而熒光定量PCR是實時檢測熒光信號,除了導熱性和密封性外,對透光性和避光性也有所要求。

  簡而言之,做熒光定量PCR的耗材也可以做普通PCR,反之則不行。

  導熱性

  導熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準確度也越高。

  密封性

  密封性越好,產物的揮發越少,得到的產物就越多,同時氣溶膠的產生也越少,對于下一輪實驗的污染也就越少,也就意味著假陽性的產生率越低。

  避光性

  這是針對熒光定量而言的,如果我們在整個實驗過程中沒注意避光,帶有熒光的試劑過度被消耗,那直接就會影響我們實驗的擴增效率,導致產生不準確的結果。

  透光性

  這也是對于熒光定量而言,我們知道它是一種實時定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接關系到我們檢測到的熒光信號多少。如果選擇耗材透光性良好,需要檢測到的信號就會變得微弱,那就會造成我們對結果的誤判。所以對于熒光定量而言,白色PCR板效果優于透明PCR板。

  PCR耗材 本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。




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