SiR-actin具有熒光性、細胞通透性和對F-actin的高度特異性。Sir-actin染色內源性的F-actin不需要基因操作或過表達。它在遠紅光中的發射最大限度地降低了光毒性和樣品的自身熒光。SiR-actin兼容GFP和/或m-cherry熒光蛋白質。它可以用標準的Cy5濾鏡進行成像。SiR-actin可用于活細胞和組織的寬視場、共聚焦、SIM或STED成像。探針數量允許50 - 200染色實驗。*(*基于以下條件:0.5 - 1ml染色液/ 0.5 - 1um探針濃度的染色實驗。染色實驗的數量可以通過減少體積或探針濃度來進一步增加)。
艾美捷 SiR-Actin試劑盒#CY-SC001物理特性:
abs 652 nm
Em 674 nm
ε652 nm 1.0·105 mol-1·cm-1
MW 1241.6 g/mol
MF C71H88N8O10Si
SiR-Actin細胞成像
SiR-actin的成像最好使用標準Cy5設置進行。標記后,活細胞可以無需洗滌步驟即可立即成像??蛇x地,一個簡單的洗滌步驟包括更換一次用不含探針的新鮮培養基標記溶液通常提高信噪比。如果時間流逝進行成像時,建議在整個實驗過程中保持探針濃度等于或低于100nM獲得恒定的信號,并避免探針干擾肌動蛋白動力學(減少細胞增殖)。如果清洗細胞
在成像之前,染色將持續幾個小時。
探針濃度(nM) 建議標記時間(h)*
> 1000 0.5 - 1
500 3 - 4
200 4 - 6
< 100 6 - 12
SiR-Actin試劑盒文獻參考:
1. Fluorogenic probes for live-cell imaging of the cytoskeleton, G. Lukinavi?ius et al., Nature Methods, 11, 731–733 (2014)
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