研域生物流式細(xì)胞術(shù)儀器操作知識(shí)參數(shù)分析分享!
流式細(xì)胞術(shù)是一種對(duì)溶液中單個(gè)細(xì)胞或顆粒進(jìn)行快速、多參數(shù)分析的技術(shù)。流式細(xì)胞儀利用激光作為光源,照射在細(xì)胞上,產(chǎn)生散射光和熒光信號(hào),由檢測(cè)器如光電二極管或光電倍增管讀取。之后,這些信號(hào)被轉(zhuǎn)換成電子信號(hào),由計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析,并寫入標(biāo)準(zhǔn)格式(.fcs)數(shù)據(jù)文件。另外,細(xì)胞群可以根據(jù)其熒光或散射光的特性進(jìn)行分析或分選。
用于流式細(xì)胞術(shù)的儀器在過(guò)去的幾十年里不斷“進(jìn)化”著,以滿足越來(lái)越多的科研與臨床應(yīng)用需求。本文將為大家簡(jiǎn)單介紹幾種流式細(xì)胞儀。
傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀
傳統(tǒng)的流式細(xì)胞儀由液流、光學(xué)和電子(檢測(cè)分析)三個(gè)系統(tǒng)組成。液流系統(tǒng)主要由鞘液(通常是一種緩沖鹽水溶液)構(gòu)成。在一定壓力下,鞘液將細(xì)胞或顆粒聚焦在一條直線,并將其輸送到激光攔截點(diǎn)。
光學(xué)系統(tǒng)由激發(fā)光 (激光器)和收集光(光電倍增管或PMTs和光電二極管)組成,產(chǎn)生用于分析樣品的散射光和熒光信號(hào)。一系列的雙色向?yàn)V光片可引導(dǎo)熒光到特定的探測(cè)器,以便每一個(gè)單獨(dú)的熒光色素可以被檢測(cè)和測(cè)量。更具體地說(shuō),雙色向?yàn)V光片只允許波長(zhǎng)較短或較長(zhǎng)的光通過(guò),并以一定角度反射不能通過(guò)的光。例如,450雙色向長(zhǎng)通濾光片(DLP)讓波長(zhǎng)大于450 nm的光通過(guò)濾光片,并以一定角度反射較短波長(zhǎng)的光,發(fā)送到另一個(gè)探測(cè)器。帶通濾光片只允許一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的熒光通過(guò)。例如,450/50帶通濾光片只允許波長(zhǎng)為450 +/- 25 nm的熒光通過(guò)。
電子系統(tǒng)將探測(cè)器發(fā)出的信號(hào)轉(zhuǎn)換成可以被計(jì)算機(jī)讀取的數(shù)字信號(hào)。
常見的多激光系統(tǒng)通常有20個(gè)參數(shù)(FSC, SSC和18個(gè)熒光探測(cè)器)。目前,一些新的儀器正在引入5個(gè)或更多的激光器,并設(shè)置30-50個(gè)參數(shù),但這并不常見。傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀使用的常見的激光是488 nm(藍(lán)色)、405nm(紫色)、532nm(綠色)、552nm(綠色)、561 nm(綠)、640 nm(紅色)和355 nm(紫外線),還有一些不常見的激光可用于特定用途。此外,還有一些儀器已經(jīng)用電子崩光電二極管(APD)取代光電倍增管(PMT)用于熒光檢測(cè),目的是提高檢測(cè)的靈敏度。
以上內(nèi)容是上海研域生物就流式細(xì)胞術(shù)儀器操作知識(shí)參數(shù)分析分享,望為您的科研事業(yè)添磚加瓦!
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。