冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素S（thioflavine S）熒光染色試劑盒

產品說明書（中文版）

主要用途

冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素S（thioflavine S）熒光染色試劑是一種旨在使用硫磺素S染色技術，與淀粉樣蛋白結合，來分析存檔中的冰凍組織切片中蘋果綠熒光現象的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的淀粉樣蛋白檢測。廣泛用于淀粉樣蛋白樣疾病的病理生理的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，熒光清晰。

技術背景

淀粉樣蛋白（AMYLOID）是一種同質性、嗜伊紅性（eosinophilic）、不溶性的纖維蛋白（fibrous protein）聚合體，具有共同的β交叉折疊層（β sheet）組織結構特征，沉積在細胞外。蛋白質錯誤折疊（misfolding），且異常自我聚集將導致淀粉樣變性（amyloidosis），細胞毒纖維沉積，產生組織損傷，進而引起23種不同淀粉樣蛋白綜合癥，超過400種疾病，包括阿茨漢姆癥、巴金森氏癥、II型糖尿病、白內障、朊病毒疾病等。淀粉樣蛋白斑（amyloid plaque）和神經纖維纏結（neurofibrillary tangles；NFT）是淀粉樣蛋白綜合征的病理性特征。硫磺素S（thioflavine S），苯并噻唑（benzothiazole）衍生物，含有至少6種成分，通過脫氫硫甲苯胺（dehydrothiotoluidine）與磺酸（sulfonic acid）的甲基化而成，是*的淀粉樣蛋白熒光探針。較之硫磺素T（thioflavine T），硫磺素S更為特異，且結合能力強。一旦與淀粉樣蛋白纖維結合，在熒光顯微鏡下（激發波長470nm，散發波長510nm），呈現蘋果綠熒光。

產品內容

清理液（Reagent A）

100毫升

固著液（Reagent B）            10毫升

氧化液（Reagent C）            10毫升

去干擾液（Reagent D）          10毫升

染色液（Reagent E）            10毫升

強化液（Reagent F）            20毫升

穩定液（Reagent G）            10毫升

產品說明書               1份

保存方式

保存 染色液（Reagent E）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里； 染色液（Reagent E），避免光照；有效保證3月

用戶自備

（共聚焦）熒光顯微鏡：用于組織細胞染色后觀察分析

實驗步驟

一、 樣本固著處理

1． 取出10片待測的冰凍組織切片

2． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

3． 室溫下孵育2分鐘

4． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

5． 小心加上200微升 固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

6． 室溫下孵育5分鐘

7． 小心移去切片上的 固著液（Reagent B）

8． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

9． 室溫下孵育2分鐘

10． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

二、樣本染色處理

1． 小心加上200微升 氧化液（Reagent C），鋪滿整個切片樣品表面

2． 室溫下孵育5分鐘

3． 小心移去切片上的 氧化液（Reagent C）

4． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

5． 室溫下孵育1分鐘

6． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

7． 小心加上200微升 去干擾液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面

8． 室溫下孵育5分鐘

9． 小心移去切片上的 去干擾液（Reagent D）

10． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

11． 室溫下孵育1分鐘

12． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

13． 小心加上200微升 染色液（Reagent E），鋪滿整個切片樣品表面

14． 室溫下孵育8分鐘，避免光照

15． 小心移去切片上的 染色液（Reagent E）

16． 小心加上200微升 強化液（Reagent F），鋪滿整個切片樣品表面

17． 室溫下孵育1分鐘

18． 小心移去切片上的 強化液（Reagent F）

19． 重復實驗步驟16至18一次

20． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

21． 室溫下孵育1分鐘

22． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

23． 重復實驗步驟20至22二次

24． 小心加上200微升 穩定液（Reagent G），鋪滿整個切片樣品表面

25． 在4℃冰箱里孵育30分鐘

26． 小心移去切片上的 穩定液（Reagent G）

27． 小心加上200微升 清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

28． 室溫下孵育1分鐘

29． 小心移去切片上的 清理液（Reagent A）

30． 封片

31． 即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下（激發波長470nm，散發波長510nm）觀察：

淀粉樣蛋白：呈現蘋果綠熒光

注意事項

1． 本產品為50次操作

2． 操作時，須帶手套

3． 本產品友好使用于雙重染色或重疊染色，即首先進行常規免疫熒光染色，然后進行硫磺素S染色

4． 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面

5． 組織細胞染色完成后，即刻進行熒光顯微鏡觀察

6． 用戶可以使用DAPI濾波器波長進行觀察

7． 本公司提供系列淀粉樣蛋白染色試劑產品

質量標準

1． 本產品經鑒定性能穩定

2． 本產品經鑒定熒光清晰