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冰凍切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素T(thioflavine T)熒光染色簡介

來源:銘修(上海)生物科技有限公司   2023年04月25日 11:42  

冰凍切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素Tthioflavine T)熒光染色試劑盒

產品說明書(中文版)

主要用途

  冰凍切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)硫磺素Tthioflavine T)熒光染色試劑是一種旨在使硫磺素T染色技術,與淀粉樣蛋白結合,來分析冰凍組織切片中蘋果綠熒光現象的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。主要適用于冰凍組織切片的淀粉樣蛋白檢測。廣泛用于淀粉樣蛋白樣疾病的病理生理的研究。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,熒光清晰。

技術背景

淀粉樣蛋白(AMYLOID)是一種同質性、嗜伊紅性(eosinophilic)、不溶性的纖維蛋白(fibrous protein)聚合體,具有共同的β交叉折疊層(β sheet)組織結構特征,沉積在細胞外。蛋白質錯誤折疊misfolding),且異常自我聚集將導致淀粉樣變性(amyloidosis),細胞毒纖維沉積,產生組織損傷,進而引起23種不同淀粉樣蛋白綜合癥,超過400種疾病,包括阿茨漢姆癥、巴金森氏癥、II型糖尿病、白內障、朊病毒疾病等。淀粉樣蛋白斑(amyloid plaque)和神經纖維纏結(neurofibrillary tanglesNFT)是淀粉樣蛋白綜合征的病理性特征。硫磺素Tthioflavine T),陽離子苯并噻唑(benzothiazole)衍生物,在鹽酸的參與下,通過脫氫硫甲苯胺dehydrothiotoluidine的甲基化而成,是*的淀粉樣蛋白熒光探針,體內或體外識別顯示和定量分析纖維化動力學。較之硫磺素Sthioflavine S),硫磺素T更為穩定和廣譜,體內檢測更佳,尤其適合在液體狀態下檢測。一旦與淀粉樣蛋白纖維(寡聚體)結合,其熒光強度(激發波長440nm,散發波長490nm),顯著增強,呈現蘋果綠熒光。

 

產品內容

  清理液(Reagent A          毫升

  固著液(Reagent B            毫升

  染色液(Reagent C            毫升

  強化液(Reagent D            毫升

產品說明書             1

保存方式

保存   染色液(Reagent C-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;   染色液(Reagent C),避免光照;   固著液(Reagent B)具有揮發性,注意密閉;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3

用戶自備

(共聚焦)熒光顯微鏡:用于組織細胞染色后觀察分析

實驗步驟

1. 取出10片待測的冰凍組織切片

2. 小心加上xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

3. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

4. 小心加上xx微升   固著液(Reagent B在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

5. 4冰箱里孵育10分鐘

6. 小心移去切片上的   固著液(Reagent B

7. 小心加上xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

8. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

1. 小心加上xx微升   染色液(Reagent C,鋪滿整個片樣品表面

2. 室溫下孵育10分鐘,避免光照

3. 小心移去片上的   染色液(Reagent C

4. 小心加上xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

5. 室溫下孵育1分鐘

6. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

7. 小心加上xx微升   強化液(Reagent D,鋪滿整個片樣品表面

8. 室溫下孵育10分鐘

9. 小心移去片上的   強化液(Reagent D

10. 小心加上xx微升   清理液(Reagent A在切片上,鋪滿整個切片樣品表面

11. 室溫下孵育3分鐘

12. 小心移去切片上的   清理液(Reagent A

13. 封片

14. 即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下激發波長440nm,散發波長490nm觀察:

淀粉樣蛋白:呈現蘋果綠熒光

注意事項

1. 本產品為50次操作

2. 操作時,須帶手套

3. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全

4. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面

5. 組織細胞染色完成后,即刻進行熒光顯微鏡觀察

6. 槲皮素Quercetin)、姜黃色素curcumin)、 藜蘆醇resveratrol)等會干擾檢測

7. 本公司提供系列淀粉樣蛋白染色試劑產品

質量標準

1. 本產品經鑒定性能穩定

2. 本產品經鑒定熒光清晰



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