簡單的說,PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。目前常用的技術,可以將一段基因復制為原來的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實時熒光定量PCR儀四類。
PCR儀利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈,進而達到基因復制的目的。
維護保養措施有哪些?
1、儀器安置
儀器應安放在濕度較低、灰塵較少并遠離水源和熱源的地方,無腐蝕性氣體或強磁場干擾。
環境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應保持50cm 以上距離,降低儀器之間的影響。
2、樣品臺、熱蓋定期清潔
用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具,清潔樣品臺。之后運行PCR儀,設定保持溫度為50℃,約5~10min,讓殘余液體揮發去除。
另外,熱蓋也應該用酒精或純水定期清洗,確保熱蓋清潔,溫控性能良好。對于熒光定量PCR,清潔樣品臺和熱蓋的同時,去除灰塵等雜物,保證光路清潔,降低信號干擾。
3. 使用前預熱
老款的PCR儀的性能比不上新款儀器,使用前需要進行預熱,不僅對儀器維護有好處,還能節約實驗時間。新款的儀器升溫快,但還是建議最好能在進行實驗前預熱2min,這樣可以有效延長儀器的使用壽命。
4. 定期運行維護
PCR儀器使用頻率較低的情況下,需要在儀器關閉1小時后用軟布或塑料紙覆蓋以防止灰塵進入。儀器如果長期不使用,需要至少每隔半個月進行一次開機自檢,運行20min左右。
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