液質聯用技術(LC-MS)具有復雜樣品分離能力,高靈敏度等優勢,目前在藥物、食品、質檢等行業應用越來越廣泛。本應用概述了一種LC-MS/MS方法,用于分析所有20種氨基酸,以往使用高效液相色譜檢測氨基酸時,待測樣品需要衍生化,且衍生步驟繁瑣,操作復雜,耗時較長。本應用特點在于所檢測20種氨基酸,均無需衍生化。
色譜條件
色譜柱:Super™Carbon LC, 10cm x 2.1 mm I.D, 2.7 μm;
流動相:[A]水(0.1% (v/v) 二氟乙·酸(DFA));[B]乙腈(0.1% (v/v) 二氟·乙酸(DFA))
梯度:
流速:0.2 mL/min;
柱溫:12°C;
檢測器:MSD;
進樣量:1.0 μL;
樣品:不同濃度的氨基酸混合物;
稀釋劑:水(0.1% (v/v)二氟·乙酸(DFA))
結果
圖1. 20種未衍生化氨基酸的HPLC圖譜
表1. 20種未衍生化氨基酸的保留時間
表2. 20種未衍生化氨基酸的MS分離條件
表3. 20種未衍生化氨基酸MRM裂解參數和離子
結論
該應用證明了利用LC-MS/MS技術采用對應級別的溶劑和試劑,配合Super™Carbon LC色譜柱,在不需要衍生化試劑的情況下,仍可用于20種氨基酸的檢測,避免了衍生化/未衍生化氨基酸的存在以及衍生化試劑本身的干擾,且與大多數商業方法相比,耗時更短。
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