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如何選擇跟保存液相色譜柱

來源:島津(上海)實驗器材有限公司 SGLC   2023年02月24日 17:25  
液相色譜柱選擇方法
 
一、液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的簡單思路
 
1.確定分離目的確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命,低的操縱本錢等等。
 
2.評估分析物的化學性質評估分析物的化學性質..諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。
 
3.選擇合適的色譜柱了解色譜填料的物理和化學性質。
 
二、液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的條件
 
A填料基質
 
1.硅膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩定,但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。
 
2.聚合物基質:應用pH值范圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
 
B顆粒外形
 
大多現代HPLC填料都是球形顆粒,但有時是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。
 
C顆粒粒徑
 
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
 
三、液相色譜柱的保存
 
1.反相色譜柱每天實驗后的保養:
 
使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
 
2.長期保存色譜柱:
 
如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度*好是室溫。

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