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維護(hù)高純硅膠色譜柱時(shí)需要注意這些問題
色譜法是實(shí)驗(yàn)室非常重要和常用的分析方法，由于色譜法可以連續(xù)濃縮、分離、純化和測定樣品，它已成為每個(gè)分析人員常用的分析和測試方法，并已廣泛應(yīng)用于各個(gè)行業(yè)。可以說，只要有分析任務(wù)，就用色譜分析。
在色譜操作過程中，為了維護(hù)高純硅膠色譜柱，需要注意以下幾個(gè)問題。
1、避免壓力和溫度的急劇變化以及任何機(jī)械振動(dòng)。溫度的突然變化或從高處墜落都會影響柱內(nèi)的填充情況；柱壓的突然升高或降低也會對柱內(nèi)的填料產(chǎn)生沖擊，因此應(yīng)緩慢調(diào)節(jié)流速，進(jìn)樣時(shí)閥門轉(zhuǎn)動(dòng)不宜過慢。
2、溶劑的組成應(yīng)逐漸改變，尤其是反相色譜。不應(yīng)直接由有機(jī)溶劑改為全水，反之亦然。
3、一般來說，不能反沖。只有在生產(chǎn)廠家表明可以反沖的情況下，才能通過反沖去除殘留在柱頭的雜質(zhì)。否則，反沖會迅速降低柱效。
4、選擇使用合適的流動(dòng)相（尤其是pH），避免破壞固定相。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預(yù)柱。分析柱為鍵合硅膠時(shí)，前置柱為硅膠，可以使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前被硅膠“飽和”，避免硅膠基質(zhì)在分析柱中溶解。
5、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品，尤其是生物樣品直接注入。需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是填充有類似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
6、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑清洗，以除去柱內(nèi)殘留的雜質(zhì)。清洗時(shí)，對流路徑系統(tǒng)中流動(dòng)相的更換應(yīng)逐漸用可混溶的溶劑轉(zhuǎn)移，每個(gè)流動(dòng)相的體積應(yīng)為柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。
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