在材料類透射電鏡(TEM)中對電子束敏感材料實現三維重構較為困難。主要原因是電子束會破壞樣品,導致數據失真。低溫是解決這個問題的有效方法,通過搭配冷凍樣品桿,將樣品置于低溫條件,即可有效減輕電子束對樣品的損傷,從而幫助我們采集到足夠的圖像實現三維重構。
因為Talos F200系列材料透射電鏡具有大極靴間距,低劑量模式和賽默飛三維重構全套解決方案(包括自動化三維重構數據采集軟件,數據對中重構軟件Inspect3D和數據渲染軟件Avizo),所以只需配備相應的冷凍三維重構樣品桿即可升級實現低溫冷凍狀態下的三維重構。
圖1是在透射電鏡Talos F200系列透射電鏡上利用冷凍樣品桿觀察到的脂質體。脂質體是目前藥物輸送系統中研究極為廣泛的納米藥物載體,它是由磷脂和膽固醇組成的脂質雙分子層所構成的封閉囊泡。脂質體具有類生物膜結構,可包封水溶性和脂溶性藥物。其選擇性高、無毒性、無免疫原性、適于生物體內降解。脂質體作為藥物載體,具有高度的靶向性、能有效保護被包裹藥物并可控釋緩釋藥物、顯著提高藥物治療指數、降低藥物的不良反應。脂質體的原始形態的保存對溫度和濕度都有較高的要求。如今通過冷凍樣品桿冷凍轉移的方式,即可在Talos F200系列材料透射電鏡中觀察脂質體樣品,并獲得良好的圖像襯度。

圖1. 在Talos F200系列透射電鏡上搭配冷凍樣品桿采集的脂質體TEM明場像
進一步利用Talos電鏡的大間距極靴,可以實現-70~70°的大角度傾轉,從而完成三維重構數據的采集。在此過程中,樣品全程冷凍在-170℃以下玻璃態冰層中,從而顯著減輕了電子束對樣品的損傷,為探索脂質體的三維結構奠定了基礎。之后再利用Inspect 3D軟件對數據進行對中重構,Avizo軟件進行數據渲染,即可真實還原脂質體的三維結構。
Talos F200系列材料電鏡還可配備對稱分布的能譜探頭,可以實現能譜三維重構,獲得樣品中元素的三維分布。冷凍技術,低劑量模式,圖像和能譜三維重構技術的碰撞,為我們提供了更多的可能性,拓寬了材料類透射電鏡的應用場景。
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