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心肌細(xì)胞培養(yǎng)作為一種體外研究模型，可以更便捷的從細(xì)胞和分子水平對(duì)其生長(zhǎng)、發(fā)育、生理、代謝、病理等進(jìn)行研究。在許多研究領(lǐng)域原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞作為一種主要的研究模型，被廣泛應(yīng)用于心血管研究之中。
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)是體外研究心血管疾病相關(guān)機(jī)制的主要手段和基本技術(shù)。基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)中，與細(xì)胞系相比，原代心肌細(xì)胞的形態(tài)及電生理方面更接近在體細(xì)胞，因此，培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞的質(zhì)量直接關(guān)系實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程及結(jié)果。
大鼠心肌原代細(xì)胞的處理方法，給大家分享：
1.大鼠的選擇
新生大鼠鼠齡的選擇新生大鼠心肌細(xì)胞在出生后3 d內(nèi)具有部分的增殖能力，成年大鼠心肌細(xì)胞則為終末分化細(xì)胞，不再具有分裂增殖能力。因此，大鼠出生時(shí)間越短，其心肌細(xì)胞分離后成活率越高，越容易貼壁生長(zhǎng)。大量觀測(cè)表明，選擇1~3 d齡大鼠分離其心肌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)較為理想.其中尤以半日齡大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)效果較好。
2.最常見的酶消化法
0.1%的胰蛋白酶重復(fù)消化乳鼠心肌組織多次，收集的細(xì)胞用含15%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基混懸后過(guò)濾,純化心肌細(xì)胞后置CO2培養(yǎng)箱孵育。結(jié)果培養(yǎng)的心肌細(xì)胞4～6 h后開始貼壁生長(zhǎng)，12～24 h明顯增殖，3～4 d后細(xì)胞匯合成片。在倒置顯微鏡下心肌細(xì)胞呈圓形，梭形，多角形，伸出偽足，出現(xiàn)自發(fā)性節(jié)律性搏動(dòng)。結(jié)論應(yīng)用酶消化法可簡(jiǎn)便，快速地獲得大量活力高的心肌細(xì)胞。
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