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如何預防凍存管爆炸

來源:上海沃元科技有限公司   2023年02月08日 10:59  
  平時在實驗過程中我們可能會用到凍存管對樣品進行凍存,但是在用液氮進行凍存的時候經常會發生凍存管爆炸的事件,這不僅會使實驗樣品損失,甚至可能會對實驗人員造成傷害。那么如何避免這種情況發生呢?
  液氮滲入凍存管內,當把凍存管從液氮罐取出時,液態氮揮發,導致體積迅速膨脹而不能及時排出引起爆炸。具體原因就是1. 凍存管質量差;2.凍存管的蓋子沒擰緊,導致液氮進入管內,當從液氮罐取出后或者在水浴加熱復蘇時,管內液氮迅速氣化,體積急劇膨脹而發生爆炸。
  解決方案:
  1. 避免接觸。液氮罐的細胞留種用,平時常用細胞的放-80冰箱就行了,只要不融化,可以保存一年半載沒問題,這就大大降低了從液氮取細胞的概率。
  2. 凍存管。用進口的凍存管;沒有的話就盡量使用內旋的凍存管,這樣液氮氣化時相對于外旋的凍存管容易排出,不易爆炸;如果只有外旋的凍存管,那么取出后就盡快倒置凍存管或者水平放置數十秒,等液氮流出后再復蘇細胞。
  3. 凍存細胞時盡量加多一點凍存液,比如2ml凍存管加1.8ml凍存液,保留少量空間。
  4. 凍存細胞時凍存管口盡量擰緊。
  5. 封口膜的使用。其實封口膜在液氮中根本不起作用。液氮溫度極低,封口膜因此會變得很脆,不能阻止液氮進入,而液氮更容易殘留在管壁和封口膜之間,更加危險。有些人會用醫用白膠布在封口處纏一圈,會有一定的作用。
  6. 復蘇前防護:帶好帆布手套和實驗防護眼鏡,準備好鑷子(避免溫度高的手直接接觸凍存管給凍存管升溫,同時保護手凍傷或炸傷)。
  7. 從液氮里取細胞的時候,先在液氮罐上面的蒸汽里放一會,然后再拿出來,將凍存盒殘余的液氮流到罐內,避免拿出時凍傷,也避免細胞從液氮迅速升到室溫發生爆炸。
  8. 取出凍存管后:①可以先放-80℃冰箱,讓液氮揮發出來后,再復蘇;②或者先把管子從液氮中移到冰上,待液氮揮發;③再或者先將凍存管平放在吸水紙或干毛巾上數十秒,待管內液氮自然流出且揮發至沒有氣體冒出,再復蘇細胞(凍存管直立起來后管內液氮很難在短時間內流出和揮發出,而放平以后,液氮會快速從管縫隙中滲漏出來);④或者迅速將管子擰松口,幫助液氮快速出來。

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