1、接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張) 。
2、用75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內打開外包裝。
3、嚴格遵循無菌操作規范,打開細胞培養瓶。
4、細胞培養瓶內的培養基用吸管吸出(嚴禁直接傾倒)。
5、1000rpm, 5min離心,用吸管小心吸出上清,加入培養基,重懸細胞。
1、將重懸好的細胞轉入六孔板或者細胞培養瓶種,加入新鮮培養基,置于37C, 5%CO2 培養(大部分細胞)
培養操作:細胞培養操作指南
細胞常見問題分析:細胞培養常見問題分析
細胞在發貨前進行質檢:
1、細胞存種的活性檢測
2、細菌、真菌、霉菌污染物鏡檢
3、衣原體、支原體檢測(熒光法、培養法等)
產品質量保證及售后:
1、細胞為三代以內, 活體。運輸過程中細胞出現污染和狀態不好,我們*免費重新發貨。
2、實驗過程中若確定是客戶問題 ,客戶僅需支付物流和耗材費用,我們可重新發貨。其他根據情況靈活處理。
3、產品使用過程中, 可提供技術上的指導。
使用方法:
PANC1人胰腺癌細胞
一,燒瓶培養的處理程序
在培養瓶中接種細胞并在培養基中*填充培養基以防止運輸過程中細胞的丟失。
1、收到后,日視檢查培養物旱否有微牛物污邊的宏觀證據。
使用倒置顯微鏡(配備有相位傳感器),仔細檢查是否有微生物污染的證據。還檢查以確定大多數細胞是否仍然附著在燒瓶底部?在運輸過程中,培養物有時被粗略地處理,并且許多細胞經常分離并懸浮在培養基中(但仍然是可行的)。
2、如果細胞仍然附著,無菌去除5至10毫升的運輸介質。可以節省運輸媒介以重復使用。在5%C的空氣中,在37C下培養細胞,直到它們準備進行
二、傳代程序
體積為75厘米的燒瓶。增加或減少其他尺寸培養容器所需的分離培養基的量。
1、去除和丟棄培養基。
2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液沖洗細胞層,除去所有含有胰蛋白酶抑制劑的血清痕跡。
3.添加2.0~3.0 ml胰酶EDTA溶液瓶中,倒置顯微鏡下觀察細胞到細胞層分散(取決于胰蛋白酶的批)。
注意:為了避免結塊,不要在擊打或搖晃瓶子時攪拌細胞,等待細胞分離。難以分離的細胞可以放置在37°以促進擴散。
4、加入6~8毫升的完整生長培養基,輕輕吸液,抽吸細胞。
5、在新培養容器中加入適當的細胞懸液等分試樣。
6、培養37°C培養基。
推薦裁培比為1:3: 1:4。
介質更新:每周2至3次
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