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一次性細胞培養瓶是單件無襯墊結構，設計目的是用于封閉系統。當被擰松時，此種瓶蓋類型也可被用于開放系統，設計目的（在被擰松時）是用于氣體交換的開放系統。當瓶蓋被略微擰松時，氣體可以在培養瓶的內外環境之間進行交換。細胞培養瓶含有一個0.2微米孔徑的隔濕性薄膜封住瓶蓋，可以提供持續而無菌的氣體交換，是在長期使用的情況下。
一次性細胞培養瓶一般蓋子都是封閉的，不帶內墊，常用于密閉培養，可保證其密閉性;進口的培養瓶的蓋子樣式比較多：密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。密閉蓋的性能和國產的是相同的，聚酯蓋常用于開放培養，只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內氣體與環境中氣體的交換。細胞培養實驗所需的物品、器材應進行嚴格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌（指高壓蒸汽滅菌，以下同）或用鋁箔紙包住瓶口，和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進行滅菌。
等回實驗室后，取出的培養基不要丟棄，收起來可用來培養該細胞。因為才買回的細胞比較脆弱，如果立刻換培養基（就是同一種培養基，兩個實驗室配的也有差異），可能會影響細胞形態。所以先用他們的培養基把細胞培養著，等有一定的規模再用自己的培養基。
一次性細胞培養瓶的瓶頸也有多種樣式，有直頸、斜頸、角度頸、三角形、矩形。
直頸：可以減少培養基因晃動而流到瓶蓋里;
斜頸：易于傾注，移液管或者細胞刮容易進入瓶體;
角度頸：移液管或者細胞刮易于進入瓶身，并且可減少培養基因晃動而流到瓶蓋;
三角形：移液管或細胞刮更易達到瓶角，寬底增加穩定性;
矩形：斜頸的矩形培養瓶瓶底至瓶頸是一個坡度設計，易于傾注，移液管或者細胞刮容易進入瓶體，大部分斜頸瓶都有一個裙邊以增加穩定性。直頸和角度頸的矩形培養瓶整個瓶底都是培養面，節省空間并減少培養基因晃動而流到瓶蓋。
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