手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
規格：50管/24樣
注意：正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
AKP/ALP 是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP 廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。
測定原理：
在堿性環境中，AKP/ALP 催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與 4-氨基安替比林和鐵氰化反應紅色亞醌衍生物，在 510nm 有特征光吸收；通過測定 510 nm 吸光度增加速率，來計算AKP 活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1 瓶，4℃避光保存，未變成藍綠色之前均可使用。
標準品：液體×1 支（EP 管中），2 μ mol/mL 酚標準液，4℃保存。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，
加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿，4℃、8000g 離心 10min，取上清液待測。
2. 血液可直接測定，或者適當稀釋后測定。
測定步驟：
1. 分光光度計預熱30min，調節波長到510nm，蒸餾水調零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30min。
3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸餾水，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，加入20μL標準品，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm 測定吸光度，記為A標準管。
5. 對照管：取EP管，加入200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻；最后加入20μL上清液，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A對照管。
6. 測定管：取EP管，加入20μL上清液，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于 37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm 測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
規格：50管/24樣
注意：正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
AKP/ALP 是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP 廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。
測定原理：
在堿性環境中，AKP/ALP 催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與 4-氨基安替比林和鐵氰化反應紅色亞醌衍生物，在 510nm 有特征光吸收；通過測定 510 nm 吸光度增加速率，來計算AKP 活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體×1 瓶，4℃避光保存，未變成藍綠色之前均可使用。
標準品：液體×1 支（EP 管中），2 μ mol/mL 酚標準液，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，
加入 1mL 試劑一）進行冰浴勻漿，4℃、8000g 離心 10min，取上清液待測。
2. 血液可直接測定，或者適當稀釋后測定。
測定步驟：
1. 分光光度計預熱30min，調節波長到510nm，蒸餾水調零。
2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30min。
3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸餾水，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，加入20μL標準品，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm 測定吸光度，記為A標準管。
5. 對照管：取EP管，加入200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻；最后加入20μL上清液，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A對照管。
6. 測定管：取EP管，加入20μL上清液，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于 37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm 測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心