細胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,RNA等導(dǎo)入真核細胞的技術(shù)。轉(zhuǎn)染,是將外源性基因?qū)爰毎麅?nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染的途徑大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類:
1、物理介導(dǎo):
電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰毎姆独?/p>
2、化學(xué)介導(dǎo):
方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)。
3、生物介導(dǎo):
方法有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。
理想細胞轉(zhuǎn)染方法,應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),是目前轉(zhuǎn)染效率zui高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是,病毒轉(zhuǎn)染方法的準備程序復(fù)雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法,則各有其特點。
需要指出的一點,無論采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù),要獲得的轉(zhuǎn)染結(jié)果,可能都需要對轉(zhuǎn)染條件進行優(yōu)化。影響轉(zhuǎn)染效率的因素很多,從細胞類型、細胞培養(yǎng)條件和細胞生長狀態(tài),到轉(zhuǎn)染方法的操作細節(jié),都需要考慮。
應(yīng)用:在研究基因功能、調(diào)控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)等生物學(xué)試驗中。
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