產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

斐林試劑(Fehling's Reagent)又稱菲林試劑或裴林試劑，是德國(guó)化學(xué)家Hermann von Fehling 1849年所發(fā)明，與班氏試劑(Benedict's Reagent)相似，均是用來(lái)檢測(cè)還原糖的存在，其原理是與可溶性的還原性糖(葡萄糖、果糖和麥芽糖)在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

   斐林試劑(GB/T  5009.7-2016)是根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(食品中還原糖的測(cè)定)推薦的直接滴定的方法，主要由酒石酸鈉鉀、硫酸銅、亞甲藍(lán)、亞鐵氰鉀等組成，本產(chǎn)品的成分、原理和用途與斐林試劑(Fehling's Reagent)稍有區(qū)別。斐林試劑(GB/T 5009.7-2016)主要用于含淀粉食品、酒飲料、碳酸飲料、肉制品、蜜餞等食品中還原糖的定量檢測(cè)；總糖的含量也可以測(cè)定，但需要提前水解后才能檢測(cè)，也可用于還原糖的定性試驗(yàn)，該方法的檢測(cè)原理是試樣經(jīng)去蛋白處理后以亞甲藍(lán)為指示劑，在加熱條件下滴定標(biāo)定過(guò)的斐林試劑(A液與B液等量混合生成的可溶性藍(lán)色的酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物，也稱作堿性酒石酸銅溶液），樣品中的還原糖將酒石酸鉀鈉銅中的二價(jià)銅還原成紅色的氧化亞銅沉淀，氧化亞銅沉淀又與亞鐵氰鉀反應(yīng)生成可溶性的無(wú)色絡(luò)合物，當(dāng)二價(jià)銅全部被還原，稍過(guò)量的還原糖把亞甲藍(lán)還原，溶液就由藍(lán)色變?yōu)闊o(wú)色，即為滴定終點(diǎn)，根據(jù)樣品液的消耗體積計(jì)算還原糖含量；本產(chǎn)品未經(jīng)標(biāo)定，需客戶自行標(biāo)定。該試劑僅適用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料：

1、試管、錐形瓶、容量瓶、玻璃珠

2、水浴鍋、酒精燈等加熱裝置

3、葡萄糖、果糖、轉(zhuǎn)化糖等還原糖標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

4、50%鹽酸水溶液、氫氧化鈉溶液

5、乙酸鋅溶液、亞鐵氰鉀溶液

6、分析天平、酸式滴定管

操作步驟(僅供參考)：

1、Fehling's Reagent 的標(biāo)定：

25ml的酸式滴定管中加入還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml)約15ml，向 150ml錐形瓶中依次加入 Fehling's Reagent A 液和B液各 5ml，再向其中加入 10ml水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時(shí)間在 2min 內(nèi)沸騰，保持沸騰以每 2 秒 1滴的速度滴加還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液， 直到溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，平行操作3次，取平均值， 計(jì)算每 10ml Fehling's Reagent(A、B 液各 5ml)相當(dāng)于還原糖的質(zhì)量(mg)。

2、試樣準(zhǔn)備：

1)含淀粉食品：稱取粉碎或混勻后的試樣 10~20g（精確到 0.001g）置于 250ml 容量瓶中， 加水 200ml,45℃水浴中加熱 1h，并時(shí)時(shí)振搖，冷卻后加水至刻度，混勻，靜置，沉淀， 吸取 200.00ml 上清液置于另一 250ml 容量瓶中，緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵氰鉀溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過(guò)去，棄去初濾液，后續(xù)濾液備用。

2)酒飲料：稱取混勻后的試樣 100g(精確到 0.01g）置于蒸發(fā)皿上，用氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發(fā)至原體積的 1/4 后移入 250ml 容量瓶中，緩慢加入乙酸鋅溶液和溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過(guò)去，棄去初濾液， 后續(xù)濾液備用。

3）碳酸飲料：稱取混勻后的試樣 100g(精確到 0.01g)置于蒸發(fā)皿上，在水浴上微微攪拌除去二氧化碳后移入 250ml 容量瓶中，用水洗滌蒸發(fā)皿，并入容量瓶，加水至刻度，混勻后備用。

4）其他食品：稱取粉碎后的固體試樣 2.5~5g（精確到 0.001g）或混勻后的液體試樣 5~25g

（精確到 0.001g）置于 250ml 容量瓶中，加水 50ml，緩慢加入乙酸鋅溶液和亞鐵氰鉀溶液各 5ml，加水至刻度，混勻靜置 30min，用干燥濾紙過(guò)去，棄去初濾液，后續(xù)濾液備用。

3、試樣溶液預(yù)測(cè)：

25ml的酸式滴定管中加入試樣溶液約15ml, 向 150ml 錐形瓶中依次加入 Fehling's Reagent A 液和 B 液各 5ml，再向其中加入 10ml 水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時(shí)間在 2min 內(nèi)沸騰，保持沸騰以先快后慢的速度滴加試樣溶液，待溶液顏色變淺時(shí)以每 2 秒 1 滴的速度滴加，直到溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗試樣溶液的總體積。(注：試樣溶液中還原糖濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)適當(dāng)稀釋后再行測(cè)定；盡量使每次滴定消耗樣液的體積和標(biāo)定斐林試劑所消耗的還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積相近，約10ml；當(dāng)濃度過(guò)低時(shí)可直接加入 10ml試樣溶液，不再加10ml水，再用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)，記錄消耗的體積與標(biāo)定時(shí)消耗的還原糖體積之差相當(dāng)于10ml樣液中所含還原糖的質(zhì)量。)

4、試樣溶液測(cè)定：

25ml 的酸式滴定管中加入試樣溶液約 20ml，向 150ml 錐形瓶依次加入Fehling's Reagent A 液和 B 液各 5ml，再向其中加入 10ml 水和 2~4 粒玻璃珠，加熱錐形瓶，控制時(shí)間在 2min內(nèi)沸騰，保持沸騰以每 2 秒 1 滴的速度滴加試樣溶液，直到溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗試樣溶液的總體積，平行操作3次，取平均值。

注意事項(xiàng)：

1、試樣溶液中還原糖濃度過(guò)高時(shí)應(yīng)適當(dāng)稀釋后再行測(cè)定，盡量使每次滴定消耗樣液的體積和標(biāo)定斐林試劑所消耗的還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積相近。

2、試樣溶液中還原糖濃度過(guò)低時(shí)，直接加入10ml試樣溶液，不再加10ml水，再用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)，記錄消耗的體積與標(biāo)定時(shí)消耗的還原糖體積之差相當(dāng)于10ml樣液中所含還原糖的質(zhì)量。

3、也可按上述方法標(biāo)定 4~20ml 斐林試劑(A、B 液各半)來(lái)適應(yīng)試樣中還原糖濃度的變化。

4、斐林試劑的 A、B 液須分開(kāi)儲(chǔ)存，臨用前按要求混合使用。

5、斐林試劑B液呈強(qiáng)堿性，需小心操作，B液含有，可消除氧化亞銅沉淀對(duì)滴定終點(diǎn)的干擾。

6、該試劑適用于各類食品中還原糖的測(cè)定，但在分析醬油等深色樣品時(shí)會(huì)受色素干擾，滴定終點(diǎn)模糊不清，影響準(zhǔn)確性。

7、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個(gè)月有效。