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細胞培養如何防止污染?

來源:上海優寧維生物科技股份有限公司   2022年12月05日 15:53  
   除特殊要求外,建議培養基中添加雙抗比較好。防止污染這件事,真的沒有那么簡單,常規操作就不贅述了,主要安利一下我們實驗室自己總結的防污染tips:
  1,從培養箱取放細胞前,用酒精清潔雙手(或手套),盡量縮短開門時間和減少開門次數。培養瓶放入培養箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精揮發后再放入,以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。
  2,操作的時候防護服、口罩、手套缺一不可。操作前,準備好所有實驗所需物品,以減少走動,物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方,同時空留足夠操作空間。
  3,操作時,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,移至操作區外圍,盡量不要從開口容器上經過。
  4,使用移液槍時,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發生倒吸情況,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導致細菌滋生。
  5,先取試劑、耗材,再取移液槍、安裝。很多人習慣先安裝,然后去拿試劑、耗材,殊不知無意間槍頭已經觸碰其他地方導致污染。
  6,向廢液缸打廢液時,需輕柔,以免造成水花四濺,污染槍頭、槍體。實驗結束,及時倒掉廢液缸垃圾,沖洗之后噴灑酒精,放入超凈臺紫外照射殺菌。
  7,凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復蘇細胞時,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,水面不可超過凍存管蓋沿;不建議直接扔進水中,以免水滲入造成污染。其實就算再嚴格,也有被污染的可能,但是總的來說,防患未然比亡羊補牢強得多,還有就是,操作過程中,對于那種模糊不清的、你不確定的有沒有污染的,寧愿認為是有菌的棄掉!也不要心存僥幸!

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