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如何正確使用反相色譜柱?

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2022年11月14日 09:28  
根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。
 
反相色譜柱是一種用于分離分析各種物質的高效液相色譜分離柱。反相色譜柱具有高效、靈敏和選擇性好等優點,廣泛應用于化工、醫藥、食品等工業領域以及環保監測等領域。
 
使用方法:
 
1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子;
 
2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱體積)沖洗,再換成流動相;
 
3.配制流動相時,應各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調pH值時要精密到0.1;
 
4.反相條件下使用時,要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發生水解的危險。理想的pH范圍在pH3.0-7.0;
 
5.如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內的析出。

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