粗膠原酶制劑含有兩種不同膠原酶的幾種亞型,一種是巰基蛋白酶、克隆蛋白酶、一種胰蛋白酶樣酶和一種氨肽酶。這種膠原蛋白水解和蛋白水解活性的結(jié)合可以有效地分解細(xì)胞間基質(zhì),這是組織分解的重要部分。復(fù)合物的一種成分是水解酶,其優(yōu)先在序列Pro-Y-Gly-Pro中的Y-Gly鍵處降解天然膠原中的螺旋區(qū)域,其中Y最常是中性氨基酸。這種裂解產(chǎn)生易于進(jìn)一步肽酶消化的產(chǎn)物。粗膠原酶被金屬螯合劑如半胱氨酸、EDTA或鄰菲咯啉抑制,但不被DFP抑制。它也被α2-巨球蛋白(一種大的血漿糖蛋白)抑制。酶活性需要Ca2+。每種膠原酶的特定酶譜已與獲得研究細(xì)胞的組織(或細(xì)胞的用途)相關(guān)聯(lián),并且由于這種關(guān)聯(lián),沃辛頓建立了幾種類型的粗膠原酶:類型1、2、3和4。
•1型粗膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、克隆蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
•2型含有較高相對水平的蛋白酶活性,尤其是clostripain。
•類型3含有最丨低水平的次級蛋白酶。
•4型設(shè)計為胰蛋白酶活性特別低,以限制對膜蛋白和受體的損傷。
•類型5含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。
•類型6含有高膠原酶活性,酪蛋白酶與膠原酶之比為2:1。設(shè)計為相對于類型I(col G)富含II(col H)膠原酶。
•7型膠原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型膠原酶高四倍。
•純化膠原酶,代碼:CLSPA,含有最丨低的二級蛋白水解活性和高膠原酶活性。
Worthington新無動物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2膠原酶來源于在完丨全不含動物成分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物,設(shè)計用于必須防止引入潛在動物源病原體的生物加工應(yīng)用。次級蛋白酶的水平類似于1型和2型膠原酶。
•CLSAFA是最初的AFA丨級,設(shè)計為具有類似于1型和2型膠原酶的膠原酶和次級蛋白酶。
•CLSAFB比CLSAFA含有更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。
•CLSAFC具有特別低的胰蛋白酶活性,類似于4型膠原酶。
•STZ1和STZ2,0.22μ過濾STEMxyme®AOF膠原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物,用于初級和干細(xì)胞分離。
艾美捷Worthington膠原酶:
•純化膠原酶,代碼:CLSPA/CLSPANK,含有最丨低的二級蛋白水解活性和高膠原酶活性。
•1型部分純化的膠原酶具有膠原酶、酪蛋白酶、克隆蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
•2型含有較高相對水平的蛋白酶活性,尤其是clostripain。
•類型3含有最丨低水平的次級蛋白酶。
•4型設(shè)計為胰蛋白酶活性特別低,以限制對膜蛋白和受體的損傷。
•類型5含有較高的膠原酶和酪蛋白酶值。
•類型6含有高膠原酶活性,酪蛋白酶與膠原酶之比為2:1。設(shè)計為相對于類型I(col G)富含II(col H)膠原酶。
•7型膠原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型膠原酶高四倍。
無動物型AFA、AFB、AFC、STZ1和STZ2膠原酶來源于在完丨全不含動物成分的培養(yǎng)基中生長的培養(yǎng)物,設(shè)計用于引入必須防止?jié)撛诘膭游镌床≡w。次級蛋白酶的水平類似于1型和2型膠原酶。
•CLSAFA是最初的AF級,設(shè)計為具有類似于1型和2型膠原酶的膠原酶和次級蛋白酶。
•CLSAFB比CLSAFA含有更高的膠原酶和酪蛋白酶活性。
•CLSAFC具有特別低的胰蛋白酶活性,類似于4型膠原酶。
•STZ1和STZ2,0.22μ過濾STEMxyme®AF膠原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物,用于初級和干細(xì)胞分離。
艾美捷Worthington粗制劑不僅含有幾種膠原酶,還含有巰基蛋白酶、clostripain(Mitchell 1968)、胰蛋白酶樣酶(Peterkofsky和Diegelmann 1971,Sparrow和McQuade 1973)和氨肽酶(Kessler和Yaron 1973)。Sugasawara和Harper(1984)以及Bond和Van Wart(1984)報道了溶組織桿菌膠原酶的純化。
Worthington從各種動植物組織和各種微生物來源(如細(xì)菌、真菌和霉菌)中提取酶。根據(jù)該酶在材料中的普遍性選擇特定酶的起始材料。其核心酶產(chǎn)品包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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