大賽璐手性柱還包括反相的系列,同時鍵合相的手性柱正相和反相都能用,只是要求在正相和反相流動相之間進(jìn)行切換的時候要用異丙醇小流速的過渡,因為大賽璐手性柱壓力都不能超過100bar。
手性分離重要的是選擇一根好的手性柱,做手性分析的都知道,大賽璐的手性柱目前占有率高,根據(jù)用途分為多種不同的型號,大家熟悉的可能是OD-H。
另外需要注意的是鍵合相手性柱的記憶效應(yīng),即流動相使用不同種類的溶劑切換時,柱效可能會下降,解決方法就是用DMF做溶劑對色譜柱進(jìn)行清洗。反相常用的溶劑包括水、甲醇、乙腈和乙醇,每種溶劑都為樣品分離提供了選擇性。
有四種填料,結(jié)構(gòu)類似,對應(yīng)的色譜柱分別是OD、AD、OJ和AS,粒徑10um,后來填料粒徑變?yōu)?um,就是賣的多、使用范圍廣的柱子,號稱四大金剛,分別是OD-H、AD-H、OJ-H和AS-H,在柱子名稱后邊加“-H”,這些柱子都只能做正相使用。
手性固定相分為π電子接受型和π電子提供型兩類。常見的π電子接受型固定相是由(R)-N-3,5-二硝基苯甲酰苯基甘氨酸鍵合到γ-氨丙基硅膠上的制成。此類刷型手性色譜柱可以分離許多可提供π電子的芳香族化合物,或用氯化萘酚等對化合物進(jìn)行衍生化后進(jìn)行手性分離。
π電子供給型固定相常見的是共價結(jié)合到硅膠上的萘基氨基酸衍生物,這種固定相要求被分析物具有π電子接受基團(tuán),例如二硝基苯甲酰基。醇類、羧酸類、胺類等,可以用氯化二硝基苯甲酰、異腈酸鹽、或二硝基苯胺等進(jìn)行衍生化后,用π電子供給型固定相達(dá)到手性分離。
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