基于點擊化學的理論，科研人員開始設計出各種含有這些配對基團的化學分子模塊用于生物分子的動態示蹤，如：通過追蹤DNA合成狀況來評估細胞增殖能力。最初，研究人員多采用放射性標記核苷摻入法，即在DNA合成過程中，摻入氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷（[³H]thymidine），合成的DNA也因此具有放射性而被檢測出。然而，該方法靈敏度低、檢測耗時長并且具有放射性污染的憂患，隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU（5’-bromo-2’-deoxyuridine）法所代替。

BrdU法改善了前者靈敏度差、效率低等問題，但該方法必須通過DNA變性（如酸變性等）來暴露BrdU表位以供BrdU抗體識別。由于步驟繁多，影響因素較多，該方法的重現性比較差。此外，與其它免疫組化染色一樣，BrdU法的染色效果受組織切片大小和抗體滲透性的影響。

Comparison of BrdU and EdU labeling on the detection of DNA synthesis

于是，Timothy J. Mitchison等人想到了將EdU（5-ethynyl-2‘-deoxyuridine），產品貨號：1149-100，這種胸苷類似物混進DNA的合成過程中。與胸苷相比，EdU（5-Ethynyl-2′-deoxyuridine，產品貨號：1149）只是將胸腺嘧啶堿基C5位上甲基替換成端炔基。由于引入的基團足夠小，不會影響EdU整合到DNA中。此外，隨后與EdU端炔基反應的熒光疊氮化物探針也只有抗體分子的500分之一的大小，能夠高效穿透組織并直接與新合成的DNA結合，操作簡單之余還會提高示蹤目標的分辨率、改善實驗操作的可重復性。

Reproducibility of EdU labeling (A) and comparison with BrdU (B) in NIH 3T3 cells

自點擊化學的概念提出以來，該反應在20年間就被引用了上萬次，可見其深遠的影響力。諾貝爾獎委員會表示：“點擊化學是一種優雅而有效的化學反應，現已被廣泛用于藥物開發、繪制DNA以及創造更符合實際需求的材料。”

名稱：EdU（5-ethynyl-2‘-deoxyuridine）

貨號：1149

品牌：ClickChemistryTools

總代：靶點科技

CAS：61135-33-9

分子量：252.23

結構：如下

隨著點擊化學ClickChemistry的被越來越多的人熟悉和知道，相關應用越來越多。尤其是體內應用點擊化學的案例不斷涌現。用不了多久，點擊化學將在體內研究中百花齊放。ClickChemistryTools提供一站式點擊化學研究工具盒，靶點科技攜手美國ClickChemistryTools為國人在點擊化學研究中添磚加瓦。