使用液相色譜進行定量分析時常采用哪種方法？

來源：上海伍豐科學儀器有限公司 2022年10月12日 09:40

標準曲線法，分為外標法和內標法。外標法在液相色譜中用的較多。內標法準確但是麻煩，在標準方法中用的較多。

1、外標法

用被測化合物的純品作為標準樣品，配制成一系列的已知濃度的標樣。注入色譜柱的到其響應值（峰面積）。

在一定范圍內，標樣的濃度與響應值之間存在較好的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。

在*相同的實驗條件下，注入未知樣品，得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。

外標法的優點：

操作、計算簡單，是一種常用的定量方法；無需各組分都被檢出、洗脫；需要標樣；標樣及未知樣品的測定條件要一致；進樣體積要準確。

外標法缺點：

實驗條件要求高，如檢測器的靈敏度，流速、流動相組成的不能發生變化；每次進樣體積要有好的重復性。

2、內標法

操作：

將已知量的內標樣加入標準樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的工作標樣。混合標樣中標樣與內標樣的摩爾比不變。注入色譜柱，以（標樣峰面積/內標樣峰面積）為響應值。根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關系，即W=f×A，制成標準曲線。

將已知量的內標樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f，即可求出欲測組分的濃度。

內標法的特點：

操作過程中樣品和內標是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測組分與內標的量的比值恒定，上樣體積的變化不會影響影響定量結果。內標法抵消了上樣體積，乃至流動相、檢測器的影響，因此比外標法精確。

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