目前,卡那霉素ELISA檢測方法作為卡那霉素殘留檢測的篩選 方法已被廣泛使用。卡那霉素(Kanamycin)Elisa試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗體,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品濃度。
卡那霉素ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
艾美捷卡那霉素ELISA試劑盒試劑盒組成:
1) 包被有抗原的96微孔板: 1塊(96 孔,12 條×8 孔)
2) 卡那霉素標準品: 6 瓶 × 1.0ml
3) 卡那霉素抗體濃縮液: 1 瓶 × 0.2ml
4) 酶標抗原濃縮液: 1 瓶 × 0.2ml
5) 濃縮洗滌液: 1 瓶 × 50ml
6) 稀釋緩沖液: 2 瓶 × 50ml
7) 顯色底物液: 1 瓶 × 17ml
8) 反應終止液: 1 瓶 × 7ml
9) 試劑盒說明書
艾美捷卡那霉素ELISA試劑盒需要的儀器、試劑:
1)儀器 —酶標儀 450nm —微量移液器 20μl~200μl,100μl~1000μl —刻度移液管 —25ml 錐形瓶或 50ml 離心管 —定性濾紙 —過濾漏斗 —天平:感量 0.01g
2)試劑 —甲醇 —蒸餾水
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