以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
人elisa試劑盒是通過酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)特定物質(zhì)的試劑盒,試劑盒中會(huì)有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品,在酶標(biāo)條中通過固相的抗原或抗體,酶標(biāo)記的抗原或抗體,酶作用的底物反應(yīng)可形成標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而進(jìn)行試驗(yàn)樣品的測(cè)定。
今天我司教你如何判斷人elisa試劑盒好壞的方法,希望能夠幫助到大家:
1、選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù),可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來說,板間CV值是較大的。
2、可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子,稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入,看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
3、對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的濃度稀釋,可測(cè)出靈敏度,建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述,也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
4、如果有相同指標(biāo)的試劑盒,可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測(cè),以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性,準(zhǔn)確性。如其中一種是的,比較可靠的話,可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
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以上是上海研域教你如何判斷人elisa試劑盒好壞的方法
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