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按照不同的方式進行分類與選擇合適的酶標板是行之有效的

來源:上海榮泰生化工程有限公司   2022年09月13日 09:09  
酶標板,是一種配合在酶標儀上,用來做酶聯(lián)免疫實驗的器材。雖然它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板,但是在酶聯(lián)免疫實驗中,酶標板是一個不可少的中介,沒有了這個中介,整個實驗就無法進行操作。換一句話說,只要你用酶標儀做酶聯(lián)免疫實驗,就必然會用到酶標板。

酶標板種類繁多,可以按照不同的方式進行分類與選擇:

一:根據(jù)酶標板底部的不同,可以分為:

1、平底:平底的折射率低,適于在酶標儀檢測。
2、U型底:U型底的酶標板折射率較高,方便加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上,直接通過目測觀察顏色變化情況,從而判定有無相應的免疫反應.
3、V型底:V底的酶標板可以精確的吸取樣品。

 

二:根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同,分為:

1、高結合力:表面經(jīng)處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。

2、中結合力:經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

3、氨基化:經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。

 

三:根據(jù)顏色分為:

1、透明:透明的是比較常用的,用于一般的酶聯(lián)免疫實驗。不能用透明的酶標板來進行化學發(fā)光實驗。
2、不透明:相對于透明的的板子,還有用于發(fā)光檢測用的不透明的板子,一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板自身會有光吸收,所以它的信號相對于白色的板子要低很多,因此一般用于檢測較強的光,如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測,常用于一般的化學發(fā)光。另外黑色的酶標板還可以消弱非特異反應帶來的問題。
 

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