Western印跡阻斷溶液是專為使用熒光色素結合抗體的Western blotting而設計的。建議使用純硝酸纖維素膜以獲得最佳性能。可以使用其他膜,例如嵌入載體中的PVDF或硝化纖維素,但可能會產生升高的背景。應使用標準方案將蛋白質從凝膠轉移到膜。阻斷緩沖液可用于膜阻斷和稀釋初級和次級抗體。
艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液適用于Bio-Rad Laboratories、GE Healthcare、Alpha Innotech、FujiFilm Life Science、Licor Biosciences、UVP和Syngene生產的熒光Western Blot成像系統。熒光技術廣泛用于在可見光和近紅外范圍內檢測蛋白質。
當熒光色素結合抗體用于蛋白質印跡和其他應用中的蛋白質可視化時,艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液允許卓丨越的信號檢測和較低的背景噪聲。
用IRDye®800和IRDye®700DX(Licor)制備的抗體綴合物™, Cy3™, Cy3.5™, Cy5™ 和Cy5.5™ (GE Healthcare),DyLight™405,動態光™ 549,DyLight™ 649,DyLight™ 680和DyLight™ 800(Thermo Fisher/Pierce)和Alexa Fluor®488、Alexa Floor®532、Alexas Fluor®546、Alexar Fluor®647和Alexas Floor®680(Invitrogen/Molecular Probe)已在各種平臺上進行了驗證,與其他相比,具有優異的結果。
在幾乎沒有自發熒光發生的紅外范圍內,特定信號在任何背景下都非常明顯,提供了*佳的信噪比。這允許在皮克范圍內檢測水平,其可與用于蛋白質印跡的膜上化學發光的靈敏度相媲美。
當艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液用于western印跡或顯微鏡中的同時標記(多重)時,也可以看到優異的結果,使用各種熒光色素組合進行多色成像。用該封閉的膜可以干燥并且非常穩定。可以重新清洗和/或重新掃描儲存的避光膜。
艾美捷 Rockland 熒光WB封閉緩沖液實例展示:
圖:Rockland 熒光WB封閉緩沖液專門設計用于蛋白質印跡熒光色素結合抗體,可用于膜分離阻斷并稀釋初級和次級抗體。制備該緩沖液使用溶于醫藥級水中的超純試劑(WFI)并由TRIS中的專有蛋白質制劑組成pH 7.6的緩沖鹽水
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