說一說熒光成像與生物發光成像的區別

來源：Vilber Bio Imaging 2022年08月08日 15:45

　　生物發光(Bioluminescence)，作為一種自然界常見的發光現象，早在晉朝就已被用于借光夜讀，留下了囊螢映雪的千古佳話。而在信息與技術飛速發展的現在，生物發光由于具有特異性強、無光毒性干擾及成像靈敏度高等優點，又逐漸成為生命科學成像研究的利器。

　　盡管同樣源自自然界的發光現象，但生物發光無論是在發光原理還是應用特點等方面都與熒光有著顯著差別。生物發光成像對整個系統的避光性、光效率、穩定性等都具有較高的要求，這使得傳統的熒光顯微鏡在成像質量、使用體驗等方面都難以滿足其需求。

說一說熒光成像與生物發光成像的區別：

　　一、熒光成像技術優點:

　　1、熒光蛋白及熒光染料標記能力更強

　　熒光標記分子種類繁多，包括熒光蛋白、熒光染料、量子點標記等，可以對基因、蛋白、抗體、化合藥物等進行標記。應用范圍極廣，可以對樣本進行多色標記，一個樣本同時獲得多種細胞或藥物的分布。

　　2、信號強度高

　　熒光成像的光子強度較生物發光更強，持續時間長，對CCD的靈敏度要求相對較低，無需必配低溫冷CCD，即可獲得清晰成像結果。

　　3、從活體到離體均可成像

　　相比生物發光只能在活細胞內才會發光。熒光蛋白或熒光染料只需保持熒光基團穩定即可穩定發光，并可在活體或離體組織器官進行觀察。在實驗前期熒光材料制備階段，可以直接在EP管中進行成像觀察。

　　二、生物發光技術優點:

　　1、特異性強，無自發熒光

　　以熒光素酶作為體內報告源的生物發光方法，特異性較強。由于動物本身沒有任何自發光，生物發光具有極低的背景和較高的信噪比。

　　2、高靈敏度

　　生物體內很多物質在激發光的照射下，也會發出熒光，這些非特異性熒光背景會影響檢測靈敏度。

　　3、精確定量

　　由于熒光素酶基因是插入細胞染色體中穩定表達的，單位細胞的發光數量、發光條件相對穩定。即使標記細胞在動物體內有復雜的定位，亦可從動物體表的信號水平測量出發光細胞的相對數量。

　　熒光成像和生物發光技術，互為補充，分別滿足不同的研究領域。對于不同的研究，可根據兩者的特性及實驗要求選擇。

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