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PE JANUS G3 BioTx ,高通量蛋白樣品純化利器簡介

來源:上海瑋馳儀器有限公司   2022年07月20日 15:29  

 

本期摘要:PE JANUS G3高通量小規模蛋白純化工作站是作為直觀、靈活和自動化的設備開發的,能夠執行并行蛋白樣本純化。除了在抗體藥領域應用廣泛,近來也在逐步助力AAV以及mRNA的純化應用。

 

從藥物篩選,成藥性分析,結構優化,藥理毒理研究直至細胞株構建,上下游工藝開發等環節——海量的蛋白樣品撲面而來,做不完的純化實驗,長夜漫漫等待下一個樣品純化,單個樣品動輒3-4個小時的時間消耗……可謂是苦“蛋白純化實驗”久矣。

高通量蛋白純化工作站為加速生物治療分子的發展提供了機會。純化條件的小型化縮短了時間,允許樣品批量平行處理,提供了更高的統計顯著性和更大的變量寬度。

PerkinElmer JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站采用模塊化配置,同一平臺達成四種模式小規模蛋白純化的自動化:

  • PhyNexus PhyTips® 帶填料吸頭

  • GE PreDictor™ / Pall AcroPrep™ 過濾板

  • Atoll RoboColumns® 層析柱

  • 重力流柱,兼容脫鹽、蛋白換液


模塊之間任意搭配或組合,只需一臺儀器即可對各種體積和濃度的樣品的快速處理,為上下游流程中“質量源于設計”實驗提供高質量的蛋白樣品。
 

JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站


JANUS G3 BioTx Pro Plus蛋白純化工作站兼容層析柱、帶填料吸頭


匠心獨運的設計理念,備受歡迎的技術呈現,和JANUS G3始終從客戶應用出發的視角是分不開的。

 

靈活處理蛋白樣品

純化樣品量比較多時:

Varispan 8通道移液臂以及配套多功能移液針單次可平行獨立處理8個樣品,可根據程序設計依次處理不同column組別;移動間距范圍寬廣兼容不同柱型、收集板以及試劑槽類型;試劑槽可根據要求選擇或定制,如消耗量比較多的柱平衡,洗滌和CIP溶液,提供的試劑槽能滿足數升的試劑容量。
 

Varispan 8 通道移液臂以及配套多功能移液針


用于樹脂篩選和方法開發的預包裝色譜柱


MDT模塊化分液技術,可實時自動化切換不同規格的96和384通道移液頭,一次實現96/384通道的樣品抽濾或者PhyTips帶填料吸頭純化,大大提高純化效率。配合抓扳手的使用,可實現整個抽濾環節的全自動處理,無需人工干預。
 

MDT分液技術實現96/384通道樣品抽濾 AcroPrep 96孔過濾板


AcroPrep 96孔過濾板


樣品體積比較大時

四通閥液體置換注射計量泵賦予移液吸頭單次可大體積5mL吸液的能力,減少多次重復吸液的次數,縮短實驗時間;同時為了得到更大回收率的蛋白樣品,可限度降低液體流加速度,提高保留時間。

除此之外,當進行完大體積移液需要更換樣品時,鋼針連同注射泵內外可自動完成內外清洗,避免交叉污染的產生。
 

四通閥注射計量泵原理示意圖


液相驅動,高精度移液

 

蛋白樣品純化時

需要使用到數種不同組分的液體,如柱平衡液、不同鹽濃度不同pH的雜蛋白洗脫液,*適的洗脫液以及柱再生液體。3板位滑動式傳送帶,可快速帶走廢液,還可定制廢液收集板,廢液體積比較大時,瞬時快速帶走。
 

滑動式傳送帶plate shuttle


純化過程的控制

1、AccuSense液面感應技術,自動液面探測和追蹤:層析柱重力柱內液面,試劑槽液體位置,確保清洗液充分清洗鋼針。
 


固定鋼針或者吸頭可探測或追蹤液面位置


 

2、當需要對蛋白樣品進行含量,純度,分子量檢測以及表征分析時,需要進行比較的歸一化處理,JANUS支持諸多分析檢測設備如nanodrop數據的直接導入,自動計算稀釋體積。同時在位選擇吸頭,以1uL的移液精度,<3.4%的穩定性滿足小體積移液的高精度要求。

鋼針吸頭同時選擇,沒有任何需要人工介入的更換操作步驟;小體積移液,大體積移液快速,PerkinElmer JANUS G3 高通量小規模蛋白純化工作站與眾不同。
 

微量體積移液時,在不同移液體積下,CV值波動極小,重復性佳


大體積移液時,性均大于99%,CV波動性更小


 

3、移動的液體收集板位,除了XY走向的移動,Z軸同樣可精細化調節。PerkinElmer*的Assay Plate設計,使得收集板和柱子底端的間距可縮短至0.5mm,以便每個樣品單獨進入各自收集孔中。而標準的Atoll RoboColumn間距至少3mm,過大的間距,液滴滴落時噴濺,會造成樣品間交叉污染。
 


 

整個流程自動化控制

利用計算機通過WinPREP操作軟件進行編程控制整個純化實驗過程,盡量減少人工干預,自動化實現預定的實驗操作。編程過程簡潔明了,可操作性強。

 

基本流程如下:

1、根據實驗目的和要求,選定收集完成操作所需的實驗器材和試劑。

2、從WinPREP操作軟件實驗器具庫中選擇相應的實驗器具,拖拉放置到工作臺面上。

3、按需實現的實驗操作選擇相應的移液模板,進行編輯。

4、拖放連線實驗器具,使之與對應的操作步驟中各個操作流程匹配。

5、在實物儀器工作臺面上,組裝放置相應的實驗器材和試劑,核對實物放置的板位和操作軟件程序中設定的板位,確保無確保無誤后,軟件運行按鈕,即可自動化實現預定的純化實驗過程。
 

 

根據通量和容量需求選擇 PerkinElmer JANUS G3 BioTx ProPerkinElmer JANUS G3 BioTx Pro Plus
 

 

PE JANUS G3高通量小規模蛋白純化工作站是作為直觀、靈活和自動化的設備開發的,能夠執行并行蛋白樣本純化。除了在抗體藥領域應用廣泛,近來也在逐步助力AAV以及mRNA的純化應用。

后期將為大家帶來PE JANUS G3與AKTA Explorer的平行比較,敬請期待!

 

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