mRNA，中文譯名“信使核糖核酸”，是由DNA的一條鏈作為模板轉錄而來的、攜帶遺傳信息能指導蛋白質合成的一類單鏈核糖核酸。以細胞中基因為模板，依據堿基互補配對原則轉錄生成mRNA后，mRNA就含有與DNA分子中某些功能片段相對應的堿基序列，作為蛋白質生物合成的直接模板。

mRNA 作為基因和蛋白質之間的重要橋梁，科學家對其的研究也一直沒有停歇。而mRNA 疫苗作為藥物，在近幾年抗擊xinguan的征程中更是大放異彩，輝瑞-BioNTech，莫德納先后推出xinguan疫苗，國內眾多醫藥公司，例如沃森生物-艾博生物，斯微生物等也紛紛做出了不少成績。

質控重要性

1.mRNA疫苗的質控是為了確保研發的成品有效性，安全性和可靠性
2.從早期研發到生產中，原材料，加工流程以及配方輔料等都有可能會發生變化，因此更需要可靠的質控方法來確保成品的質量
3.如果不能及時發現質量問題，導致嚴重的臨床試驗結果，會對消費者（患者）產生重大的安全隱患，會影響藥物的審批
4.不合格的樣品可能會導致
①不正確的PCR 擴增
②質粒線性化不佳
③低質量的轉錄反應
④RNA產物中存在DNA殘留
⑤降解的RNA

mRNA疫苗質控的指導原則
我國在2020年頒布的《xinguan病毒預防用mRNA疫苗藥學研究技術指導原則（試行）》和2022年3月美國藥典USP頒布的《Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality》  上都明確指出了mRNA疫苗質控的要求和基本解決方案，科學家們可以作為參考。

表 1 mRNA疫苗質控指標和方法（參考：《Analytical Procedures for mRNA Vaccine Quality》）

毛細管電泳在mRNA疫苗質控的應用
接下來，魯大師就參考這兩份重要指導原則給大家介紹毛細管電泳法進行mRNA疫苗質控的方法。

DNA模板質控
檢測時間點：模板PCR擴增后

檢測目的：
1.檢測PCR產物濃度和片段長度，檢測我們的目的DNA是否已經被擴增
2.檢測是否有鹽粒子污染

評判依據：
成功的PCR顯示為單峰，如果模板降解這會顯示多峰。
若基線不平整或者有釘子峰表示存在高鹽離子，若鹽粒子濃度高達100-200nM，會抑制mRNA 轉錄。

圖 1 正確的模板示意圖：如黑色峰圖顯示質粒DNA，有插入片段峰，且長度在預期范圍。

RNA體外轉錄IVT 質控
檢測時間點：體外轉錄純化后
檢測目的：檢測目的mRNA 轉錄是否成功，沒有發生降解；是否有模板DNA殘留
評判依據：mRNA和DNA 片段大小不同

1.模板殘留

2.mRNA完整性

圖 2 出現雜峰多峰表明RNA 發生降解

質控儀器和產品

看到這里屏幕前的你一定很好奇，什么樣的儀器適合做毛細管電泳來做mRNA疫苗質控呢？ 在這個領域，安捷倫是當之無愧的king。美國更是直接把安捷倫的毛細管電泳寫進了這次的mRNA疫苗指南，一整個的大安利。 而安捷倫的儀器也是陪伴著輝瑞疫苗從研發到生產的全過程。

安捷倫有兩款毛細管電泳儀器，都非常適合！
1.芯片式毛細管電泳-------安捷倫2100生物分析儀
2.陣列式毛細管電泳-------安捷倫片段化分析儀（5200,5300和5400）

配套試劑