蛋白質印跡法或蛋白質印跡法涉及將蛋白質從聚丙烯酰胺凝膠轉移到 PVDF 或硝酸纖維素膜上,以便通過特異性抗體進行檢測。艾美捷 G-Biosciences 為整個 Western 轉移過程提供高質量的試劑和資源,以確保成功轉移和清潔蛋白質檢測。
部曲:蛋白質轉移
對于初始轉移,艾美捷 G-Biosciences 具有高蛋白結合膜(聚偏氟乙烯和硝酸纖維素) 和高效率西部轉移緩沖液,包括專為高分子量蛋白質轉移. 蛋白質轉移后,強烈建議使用快速且可逆的蛋白質染色劑檢查蛋白質轉移效率,例如Swift™ 膜染色劑或者BLOT-FastStain™. 對于改進的蛋白質轉移或難以轉移的蛋白質,例如高分子量蛋白質,G-Biosciences西部轉移墊以提高傳輸效率。
第二部曲:蛋白質印跡
對于探測蛋白質轉移膜,步是用適當的封閉劑封閉非特異性結合位點。G-Biosciences 提供一整套封閉劑,包括非動物蛋白阻斷劑(午睡阻隔™或者Protein-Free™ 封閉劑)、非血清動物蛋白阻斷劑(Superior™ 封閉劑或者FISH-Blocker™, 和標準阻塞解決方案使用牛奶,酪蛋白或者牛血清白蛋白. 一個方便封閉劑試用包提供以確定要使用的J佳封閉劑。
一旦膜被封閉,就會添加選擇的一抗。G-Biosciences 提供超過 21,000 種一抗所有這些都可以直接與 HRP 或其他檢測探針結合。或者,一個二抗偶聯辣根過氧化物酶 (HRP) 或堿性磷酸酶 (AP) 可用于檢測一抗。一抗和二抗孵育后,需要用洗滌緩沖液*清洗膜(TBS-Tween 或 PBS-Tween)。
第三部曲:蛋白質檢測
最后一步是蛋白質檢測,檢測探針通過化學發光或者顯色反應。G-Biosciences femtoLUCENT™ PLUS和picoLUCENT™ PLUS是 HRP 和 AP 的高靈敏度化學發光試劑,而femtoCHROMO™-AP和femtoCHROMO™-HRP允許對蛋白質進行顯色檢測。
艾美捷 G-Biosciences Western ReProbe™允許用戶剝離印跡并用不同的抗體重新探測,例如管家抗體,以及Swift™ 薄膜清潔劑有助于清潔斑點和曝光過度的膠片。
G-Biosciences專注于蛋白質組學研究,廣泛應用于學術研究和工業制造領域,包括:蛋白質檢測、樣品制備、電泳、蛋白質印跡、質譜、測定開發、抗體生產和蛋白質純化等。艾美捷科技是G-Biosciences的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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