隨著越來越多的CAR-T療法批準,CAR-T生產工藝仍然面臨很多挑戰。起始材料復雜性就是其中很大的一點,接受CAR-T治療的患者之前可能接受過放療或化療,而這會導致他們的細胞處在功能低下、不健康的狀態。
如何從復雜的原材料起始又能穩定收獲高質量的細胞,我們認為在培養基的選擇上是至關重要的。
這項實驗比較了市面上的4種培養基,在IL-2和CD3/28刺激下培養PBMC。
CFSE熒光染料檢測淋巴細胞增殖
圖1:在X-VIVO、 A、T、O 培養基中培養4天的T細胞增殖比較。細胞增殖表現為細胞+培養基對照組的CFSE倍數變化。Donor=3
從比較中可以看出X-VIVO和 A培養基可以支持更好的細胞擴增。但細胞數量不是僅有的評判指標。科學家們發現,T細胞表型是治療效果的重要指標,通過觀察特定的細胞表面標記物,可以幫助選擇對治療有效的細胞亞群。CD45RO+ T細胞浸潤與總生存率(OS)和無病生存率(DFS)的改善顯著相關。
第0天和第4天的CD45RA和CD45RO亞型占總T細胞群的百分比
圖2:在X-VIVO、A、T、O 培養基中培養4天后活力變化,并通過FACS表型分析評估PBMC(T細胞)的分化。Donor=3
T細胞在培養早期自然會經歷生存能力下降,這就是為什么大多數過程必須超過7-10天。X-VIVO可以提高初始階段的細胞活率縮短培養過程,并讓收獲的細胞擁有更好表型。
這項研究表明,在市場上的標準無血清培養基中,X-VIVO培養基的性能優于競爭對手,即增殖周期較短,并收獲更多的CD45RO+T細胞用于CAR-T治療。
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