艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽(yáng)性對(duì)照/定量標(biāo)準(zhǔn)
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽(yáng)性對(duì)照/定量標(biāo)準(zhǔn)品穩(wěn)定且易于使用,在加載到凝膠上之前不需要加熱。AtpB 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品可與各種抗 AtpB 抗體結(jié)合使用,以定量來(lái)自廣泛物種的 AtpB。針對(duì) AtpB 蛋白中高度保守的氨基酸序列產(chǎn)生了全局抗體。
艾美捷Agrisera丨AtpB | 陽(yáng)性對(duì)照/定量標(biāo)準(zhǔn)品基本參數(shù):
格式 凍干,在甘油中。
數(shù)量 100 微升
重組 如需復(fù)溶,請(qǐng)?zhí)砑?nbsp;90 µl 的 milliQ 水,請(qǐng)注意該產(chǎn)品含有 10% 甘油,可能呈液體狀,但以凍干形式提供
貯存 在 -20°C 下儲(chǔ)存凍干/復(fù)溶;一旦重組,制作等分試樣以避免重復(fù)凍融循環(huán)。請(qǐng)記住在打開試管之前先稍微旋轉(zhuǎn)試管,以避免材料粘附在試管蓋或試管側(cè)面而造成的任何損失。
測(cè)試應(yīng)用 蛋白質(zhì)印跡 (WB)
推薦稀釋
標(biāo)準(zhǔn)曲線:推薦 3 次加載(0.5、2 和 4μl)。
對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用,0.2μg 葉綠素的樣品負(fù)載將在此范圍內(nèi)產(chǎn)生 AtpB 信號(hào)。
陽(yáng)性對(duì)照:每孔上樣量:2μl 上樣量是大多數(shù)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)的不錯(cuò)之選。
請(qǐng)注意,本品含有 10% 甘油,可能呈液體狀,但以凍干形式提供。加水后讓其溶解幾分鐘。*但輕輕地混合 每次使用前要格外小心地*混合,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在冷凍后往往會(huì)沉淀在更致密的層中。
預(yù)期 | 表觀分子量:在大多數(shù)凝膠系統(tǒng)中,AtpB 遷移約 50-54 kDa
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽(yáng)性對(duì)照/定量標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用示例:
圖:在4-12 % NuPage ( Invitrogen ) LDS - PAGE和_用PVDF吸干 1 小時(shí). 在室溫下攪拌 1 小時(shí),在 20 mM Tris、137 mM 氯化鈉 pH 7.6 和 0.1% (v/v) Tween-20 (TBS-T) 中轉(zhuǎn)移 2% 封閉試劑后立即封閉印跡。將印跡在 1: 50 000 稀釋度的一抗中在室溫下攪拌孵育 1 小時(shí)。將抗體溶液倒出并將印跡短暫沖洗兩次,然后在室溫下在攪拌下在 TBS-T 中洗滌一次 15 分鐘和 3 次 5 分鐘。將印跡在 2% 封閉溶液中稀釋至 1:50 000 的二抗(結(jié)合抗母雞 IgY 辣根過(guò)氧化物酶)中在室溫下攪拌孵育 1 小時(shí)。如上洗滌印跡并根據(jù)制造商的說(shuō)明用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑顯色5分鐘。
注意:準(zhǔn)確定量是使用每個(gè)凝膠泳道的中等上樣量實(shí)現(xiàn)的,通常為 0.5 至 2.5 ug 總蛋白,具體取決于目標(biāo)蛋白的豐度。
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 陽(yáng)性對(duì)照/定量標(biāo)準(zhǔn)品參考文獻(xiàn):
弗雷澤等人。(2013)。集胞藻鐵饑餓過(guò)程中的光生理和光合復(fù)合物變化。PCC 6803 和細(xì)長(zhǎng)聚球藻 PCC 7942。PLOS ONE。
Agrisera 研究包含1000種用于植物和藻類細(xì)胞生物學(xué)研究的一抗,2000多種二抗。抗體分兩大類:植物及藻類的抗體,以及細(xì)菌、真菌、昆蟲、魚等動(dòng)物類抗體。艾美捷科技是Agrisera的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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