艾美捷sGAG檢測(cè)試劑盒,Blyscan染料來(lái)助攻!
Glucosamine Sulfate,用于預(yù)防和治療各種類型的骨性關(guān)節(jié)炎,如膝關(guān)節(jié)、髖關(guān)節(jié)、脊柱、肩、手、手腕和踝關(guān)節(jié)等部位的及全身性的骨性關(guān)節(jié)炎。本藥可直接抗炎,緩解骨性關(guān)節(jié)炎的疼痛癥狀,改善關(guān)節(jié)功能,并阻止骨性關(guān)節(jié)炎病程的發(fā)展。且不會(huì)出現(xiàn)因前列腺素受抑制而引起的不良反應(yīng)。
接下來(lái)小編給大家說(shuō)的這個(gè)艾美捷sGAG檢測(cè)試劑盒——專門用于檢測(cè)樣本中的硫酸氨基聚糖,它采用常規(guī)生化方法,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線和比色,可定量分析總硫酸化多糖(氨基聚糖和蛋白聚糖)的含量,亦可測(cè)定O端和N端硫酸氨基多糖的比值。主要起作用的是Blyscan染料,它可以特異性的與氨基聚糖和蛋白聚糖上的硫酸多糖組分結(jié)合,該方法不適于檢測(cè)已經(jīng)降解的硫酸化雙糖片段。
艾美捷sGAG檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn):
可檢測(cè)廣泛的蛋白多糖,可檢測(cè)的氨基多糖包括硫酸角質(zhì)素、硫酸皮膚素、硫酸肝素,不適合檢測(cè)包含海藻酸的樣品,因?yàn)樗鼈兒刑侨┧帷T撛噭┖幸膊荒軐?duì)透明質(zhì)酸定量,但透明質(zhì)酸并不會(huì)對(duì)硫酸化氨基多糖的檢測(cè)產(chǎn)生干擾。細(xì)胞培養(yǎng)基中20%的胎牛血清也不會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)。該方法檢測(cè)靈敏度為5ug,所需時(shí)間為1小時(shí)。
艾美捷sGAG檢測(cè)試劑盒檢測(cè)樣本:
可來(lái)自軟骨組織、動(dòng)脈組織、肺組織、皮膚組織、腫瘤組織、細(xì)胞核組織提取物、細(xì)胞培養(yǎng)液、羊水和尿液
Blyscan檢測(cè)流程圖:
艾美捷sGAG檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟 :
1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
2. 待測(cè)樣品的處理:
取50ul待測(cè)樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果反應(yīng)物在656nm初的吸收峰大于1.5,則對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,待測(cè)樣樣品濃度落入標(biāo)準(zhǔn)曲線中段時(shí),準(zhǔn)確度較高。
3. 硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物的獲得
加1.0ml的Blyscan染料溶液到待測(cè)樣本中,充分混勻,待不溶物出現(xiàn),離心,棄上清,則獲得紫色的硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物
4. 硫酸氨基聚糖—染料復(fù)合物中染料的釋放
加入1.0ml的染料釋放劑,充分混勻。溶解5min以上,使染料充分釋放
5. 測(cè)定
用分光光度計(jì)于波長(zhǎng)656nm處測(cè)定,或使用colorimeter紅色濾光片測(cè)定
sGAG檢測(cè)試劑盒已發(fā)表文章,超500篇,僅摘錄展示部分:
1、Ahn, G., Min, K., Kim, C., Lee, J., Kang, D., reports, J. W.-S., & 2017 Precise stacking of decellularized extracellular matrix based 3D cell-laden constructs by a 3D cell printing system equipped with heating modules. Nature.
2、Makris, E., & Responte, D. (2014). Developing functional musculoskeletal tissues through hypoxia and lysyl oxidase- induced collagen cross-linking. PNAS 111, E4832 E4841.
3、Prewitz,M.C., Seib,F.P., von Bonin,M., Friedrichs,J., Sti+ el,A., Niehage,C., M++ller,K., Anastassiadis,K., Waskow,C. and Hoflack,B. (2013) Tightly anchored tissue-mimetic matrices as instructive stem cell microenvironments. Nature Methods 10, 788 794
4、Song,J.J., Guyette,J.P., Gilpin,S.E., Gonzalez,G., Vacanti,J.P. and Ott,H.C. (2013) Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney. Nature medicine, 19, 646-651.
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