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來(lái)源:賽爾瑞成(北京)生命科學(xué)技術(shù)有限公司   2022年05月23日 13:31  
   真核表達(dá)細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):重組DNA易轉(zhuǎn)染,遺傳穩(wěn)定,可重復(fù);識(shí)別和去除內(nèi)含子;進(jìn)行翻譯后修飾;磷酸化、糖基化、二硫鍵、寡聚體等的形成、高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確折疊;產(chǎn)品的構(gòu)型正確率高,可被改造成類人體源性, 免疫源性好;可分泌至培養(yǎng)基,提純工藝簡(jiǎn)單,成本低;可用于基因治療。細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能誘導(dǎo)高效表達(dá),對(duì)表達(dá)的蛋白進(jìn)行正確折疊,并進(jìn)行復(fù)雜糖基化修飾,蛋白活性接近于天然蛋白,不需去除內(nèi)毒素,周期較長(zhǎng),操作復(fù)雜,需要細(xì)胞房,無(wú)菌,成本投入高。
  真核表達(dá)細(xì)胞載體趨向于既有利于擴(kuò)增目的基因又有利于篩選陽(yáng)性克隆的載體的構(gòu)建。許多有效的應(yīng)用范圍廣的強(qiáng)啟動(dòng)子和增強(qiáng)子被人發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用于載體中,大大提高了目的基因的表達(dá)量,另外一些強(qiáng)的組成型啟動(dòng)子,已應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)的細(xì)胞系中。
  真核表達(dá)細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學(xué)功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。
  1.真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)及基因組結(jié)構(gòu)遠(yuǎn)比原核復(fù)雜,其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制發(fā)生在染色體活化、基因轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯及翻譯后加工等水平的調(diào)節(jié)事件也要復(fù)雜的多。
  2.原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點(diǎn):
  σ因子識(shí)別特異啟動(dòng)序列,不同的σ因子決定特異基因的轉(zhuǎn)錄激活,決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉(zhuǎn)錄。
  除個(gè)別基因外,原核生物絕大多數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇的串聯(lián)、密集于染色體上,共同組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位——操縱子。一個(gè)操縱子只含一個(gè)啟動(dòng)序列及數(shù)個(gè)可轉(zhuǎn)錄的編碼基因。

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