調(diào)整好氮氣鋼瓶所需壓力（鋼瓶上減壓閥的輸出壓力），一般為0.1左右。打開控制面板上的F2開關(guān)，同時打開真空泵開關(guān)，讓其抽走過取樣室的空氣。氮氣充入操作室內(nèi)，以手套向外伸直為止（不能過多充入，小心手套爆裂。），此時應(yīng)立即關(guān)閉F2開關(guān)。然后打開F3與F4的開關(guān)，使操作室內(nèi)的氣過渡到過道室，直到手套向內(nèi)伸直為止，為防止手套爆裂，此時應(yīng)馬上關(guān)閉F3與F4的開關(guān)，這樣氮氣的一次置換完成了，重復(fù)以上方法，做5到6次，做完后，整個氮氣的置換就完成了，關(guān)閉減壓閥和鋼瓶總閥。

混合氣體的置換方法：調(diào)整好混合氣體鋼瓶所需壓力（鋼瓶上減壓閥的輸出壓力），一般為0.1左右。打開控制面板上的F3開關(guān)，同時打開真空泵開關(guān)，讓其抽走取樣室內(nèi)的空氣。混合氣充入操作室內(nèi)，以手套向外伸直為止（不能過多充入，為防止手套爆裂。），此時應(yīng)立即關(guān)閉F3開關(guān)，然后打開F1和F2開關(guān)，使操作室內(nèi)的氣過渡到取樣室內(nèi)，直到手套向內(nèi)伸直為止，為防止手套爆裂此時應(yīng)立即關(guān)閉F1與F2的開關(guān)，這樣混合氣的一次置換完成了，重復(fù)以上方法，做5到6次，做完后，整個氣體的置換就完成了，這時操作室內(nèi)就形成了厭氧環(huán)境，并關(guān)閉真空泵開關(guān)。打開F5，并調(diào)節(jié)面板上的穩(wěn)流閥和流量計，使流量計的流量為10ml/min。直至全部實驗結(jié)束，關(guān)閉減壓閥和混合氣總閥。

真正達到你所需的厭氧狀態(tài)，還要用鈀粒分篩來吸收操作室內(nèi)的剩余氧分子，最后用指示條（指示條的藍色上加一滴純水）來測量操作室是否還有氧，指示條變色表明已經(jīng)是厭氧環(huán)境了，此時就可以進行厭氧菌的培養(yǎng)了。

實驗中，如果忘記了做實驗的工具或別的東西，需要拿到操作室里去，首先打開取樣室的外門，把所需的東西放入取樣室內(nèi)，關(guān)緊外門，打開真空泵開關(guān)，再讓其抽取樣室內(nèi)的空氣。一般壓力為-0.06到-0.08左右，到了后關(guān)閉真空泵開關(guān)，打開F1開關(guān)，向過道室內(nèi)充入氮氣，使壓力表上的指示針回落到零位，關(guān)閉F1開關(guān)，再打開真空泵開關(guān)，再抽真空，到壓力后，關(guān)閉真空泵開關(guān)。打開F4開關(guān)，向取樣室內(nèi)充混合氣直止壓力表指針回落到零位，關(guān)閉F4開關(guān)，打開取樣室內(nèi)門，把東西挪到操作室內(nèi)后，關(guān)閉內(nèi)門，如果從操作室向外拿就直接打開取樣室門（置換好氣體后沒有打開過取樣室的外門的前提下），把東西放入取樣室后關(guān)閉內(nèi)門，再打開外門就可把東西拿出來了。取樣室不是在置換氣體狀態(tài)中壓力應(yīng)為零.